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          目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學(xué)>>蛋白提取和裂解>> 真菌蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
          
		
          
	
          
    	
          
		
          
			
          真菌蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
          
		
          
		
          
			
		
          
	
          
	
          
		
          
			
          
           				    
            
			        
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			                真菌蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
			            
            
			        
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          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          
					
          
                    					
          
						
          
							
                                                         
          
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          更新時間：2024-11-10 07:31:22瀏覽次數(shù)：60評價
          
						
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                      產(chǎn)品概述                                 product description                                                                                                                              貝博® BBproExtra® 真菌蛋白提取試劑盒（小型真菌）適用于從各種除大型真菌（蕈菌）類真菌以外的其他真菌類樣本中提取總蛋白。包括各種絲狀真菌（霉菌）、小型單細胞真菌樣本。試劑盒組分針對真菌厚細胞壁樣本進行優(yōu)化，提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。   本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。   本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。   本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。
					
          
					
					
                               
                                   
                                       保存溫度                         
                                   
                                       2-8℃                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       注意事項                         
                                   
                                       1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
          2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
          3.試劑拆封后請盡快使用完！
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       有效期                         
                                   
                                       一年                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       檢測方法                         
                                   
                                       離心柱                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       適用樣本                         
                                   
                                       真菌                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       產(chǎn)品特點                         
                                   
                                       1、 使用方便。
          2、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
          3、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
          4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       產(chǎn)品應(yīng)用                         
                                   
                                       離心柱                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       儀器準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.離心機
          2.振蕩器
          3.渦旋混勻器
          4.移液器
          5.冰箱
          6.冰盒                          
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       試劑準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.PBS緩沖液 
          2.蛋白定量試劑盒                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       耗材準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.離心管
          2.吸頭
          3.一次性手套                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       使用注意事項                         
                                   
                                        使用注意事項：
          ? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
          ? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
          ? 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
          ? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
          ? 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
          ? 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
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                                       使用方法                         
                                   
                                       1. 提取液制備：
          每500 μl冷的真菌蛋白提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物，4 μl真菌蛋白提取液B，混勻后置冰上備用。
          2. 取50-100 mg真菌樣本，置于研缽中用液氮研磨。
          3. 研磨后加入500 μl真菌蛋白提取液。
          4. 混勻后，在4℃條件下振蕩20-60分鐘。
          5. 將離心管內(nèi)管套上套管，將提取液吸入離心柱內(nèi)柱，在4℃，10000×g條件下離心5分鐘。
          6. 收集套管內(nèi)液體即得即可得到真菌總蛋白。
          7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?br>                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       常見問題分析                         
                                   
                                       1.蛋白濃度低？
          處理部分樣本時可能沒有裂解，導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

          2.用什么方法定量蛋白？
          建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

          3.提取的蛋白具有活性嗎？
          本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒有對蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       參考文獻                         
                                   
                                       1.Peng-WeiHuang, et al.   
          The construction of CRISPR-Cas9 system for endophytic Phomopsis liquidambaris and its PmkkA-deficient mutant revealing the effect on rice
          Fungal Genetics and Biology         2020

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          Proteome analysis provides insight into the regulation of bioactive metabolites in Hericium erinaceus
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