詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C8
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
RNF148(Ring finger protein 148) 環(huán)指蛋白148抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Phospho-Bcl-2 (Thr56) 磷酸化Bcl-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PHKB 磷酸化酶β抗體 規(guī)格 0.2ml
Keratin 18 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
C14orf130 英文名稱: 14號染色體開放閱讀框130抗體 0.2ml
Phospho-CD18 (Ser756) 英文名稱: 磷酸化整合素β2/Integrin β2抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Bcl-2 (Thr56) 磷酸化Bcl-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-C/EBPalpha (Ser21) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml
TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成素 96T
phospho-LCK(Tyr394) 英文名稱: 磷酸化淋巴細(xì)胞特異性蛋白酪酸激酶抗體 0.1ml
AMBRA1 英文名稱: 自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體 0.2ml
Anti-Phospho-C/EBPalpha (Ser21) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒,英文名:Bid ELISA KiISA Kit for Human Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2大鼠20S蛋白酶體(20SP)ELISA試劑盒,英文名:20SP ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-5大鼠血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)ELISA試劑盒,英文名:SAP ELISA KiISA Kit for Human Sphingosine 1-phosphate receptor 1大鼠腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)ELISA試劑盒,英文名:ADRα2C ELISA KiISA Kit for Human Neuromedin-K receptor大鼠抗利尿激素(ADH)ELISA試劑盒,英文名:ADH ELISA KiISA Kit for Human Tubulin beta-3 chain大鼠肝源性生長因子(HDGF)ELISA試劑盒,英文名:HDGF ELISA KiISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor A大鼠白介素9(IL9)ELISA試劑盒,英文名:IL9 ELISA Kit
人蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)因子SWEET1(SWEET1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠孕烷X受體(PXR)ELISA試劑盒,英文名:PXR ELISA Kit大鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒,英文名:PⅠNP ELISA KiISA Kit for Human ATP-citrate synthase小鼠長停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)ELISA試劑盒,英文名:gas-6 ELISA KiISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒,英文名:VD3 ELISA KiISA Kit for Human Muellerian-inhibiting factor小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒,英文名:FⅡ ELISA KiISA Kit for Human Carbonic anhydrase 3小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒,英文名:SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit人谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT2)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒,英文名:ADAM9 ELISA Kit
兔抗人纖維蛋白原 0.5ml 國產(chǎn)
WNK3 protein 英文名稱: 絲酸/蘇酸激酶家族成員的基因WNK3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CEBP beta (Thr235) 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 規(guī)格 0.1ml
IFITM1 (interferon induced transmembrane protein 1) 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DRIP1 英文名稱: 多巴胺受體相互作用蛋白1抗體 0.2ml
Anti-Adenylyl cyclase/AC 腺苷酸環(huán)化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN培養(yǎng)Anti-RPLP0/FITC 熒光素標(biāo)記酸性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 Anti-Melan-A/MART-1 0.1ml
4 Hydroxynonenal 英文名稱: 4羥基壬烯酸抗體 0.1ml
FEN1 英文名稱: 結(jié)構(gòu)特異性核酸酶FEN1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體 規(guī)格 0.1ml
ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg