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人二倍體細(xì)胞；HEL培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿(mǎn)，光澤度好，*，專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶(hù)！
詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱(chēng) 人二倍體細(xì)胞；HEL培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 HEL是一株人二倍體細(xì)胞系，具有典型的成纖維細(xì)胞形態(tài)，染色體2n＝46?？捎糜谧鞫喾N病毒的宿主，抗衰老藥物試驗(yàn)等。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
人二倍體細(xì)胞；HEL培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
人二倍體細(xì)胞；HEL培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
F VII (Human coagulation factor VII ) ELISA Kit 人凝血因子ⅦMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
INH-A ELISA Kit 大鼠抑制素A 96T
AMPKγ2 英文名稱(chēng)： 腺苷單磷酸活化蛋白激酶γ2抗體 0.2ml
C2orf49 英文名稱(chēng)： 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體 0.2ml
Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
VK1 ELISA Kit 大鼠維生素K1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ADRA2/FITC 熒光素標(biāo)記alpha-2腎上腺素能受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FECH/Ferrochelatase 鐵螯合酶抗體 規(guī)格 0.2ml
HL ELISA Kit 大鼠肝脂酶 96T
MYBPC1 英文名稱(chēng)： 肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體 0.2ml
AX2R 英文名稱(chēng)： 膜粘連蛋白2受體抗體 0.2ml
Anti-ADRA2/FITC 熒光素標(biāo)記alpha-2腎上腺素能受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人維生素D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠抗肌萎蛋白(UTRN)ELISA試劑盒，英文名：UTRN ELISA Kit人高爾基蛋白73(GP73)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒，英文名：CRYαB ELISA Kit人E3泛素蛋白連接酶HUWE 1(E3 ubiquitin-protein ligase HUWE1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒，英文名：GAPDH ELISA KiISA Kit for Human Nicotinamide phosphoribosyltransferase大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒，英文名：CT ELISA Kit吡啶酚(Pyridinoline)ELISA試劑盒通用96T6.25-400 nmol/L大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒，英文名：BMPR-Ⅱ ELISA KiISA Kit for Human Xaa-Pro dipeptidase大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒，英文名：PRG4 ELISA Kit人前胸腺素α（Prothymosin alpha）ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒，英文名：IL-2sRβ ELISA Kit
人β氨基己糖苷酶β(HEXB)ELISA試劑盒人96T1.56-100 U/mL小鼠干擾素γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)ELISA試劑盒，英文名：MIγ ELISA KiISA Kit for Human Pyruvate kinase isozymes M1/M2大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒，英文名：NAG ELISA Kit人蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)因子1(RGS1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒，英文名：GMCSF/CSF2 ELISA KiISA Kit for Human Syntenin-1大鼠音猬因子(SHH)ELISA試劑盒，英文名：SHH ELISA Kit人鋅指蛋白2(SNAI2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠細(xì)胞絨毛蛋白(CVL)ELISA試劑盒，英文名：CVL ELISA KiISA Kit for Human Serpin B3大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白B(NGFIB)ELISA試劑盒，英文名：NGFIB ELISA Kit人皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白ELISA試劑盒人96T39-2500 nmol/L大鼠硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA試劑盒，英文名：HSPG ELISA Kit
纖維素膜(15×60cm 0.45um) 1張 Pall-Gelman
ZNF312 英文名稱(chēng)： 鋅指蛋白312抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-DDX58 (Ser8) 磷酸化DDX58抗體 規(guī)格 0.1ml
GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷氨酸脫羧酶-67抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DCIR/CLEC4A 英文名稱(chēng)： C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體 0.2ml
CLEC7A Dectin-1 / CLEC7A 兔單抗 (PE) Mouse
人二倍體細(xì)胞；HEL培養(yǎng)Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 規(guī)格 1ml
17-OHP ELISA Kit 大鼠17羥孕酮 96T
Protein C inhibitor 英文名稱(chēng)： 蛋白C抑制因子抗體 0.1ml
CD4 英文名稱(chēng)： CD4抗體 0.1ml
Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人二倍體細(xì)胞；HEL培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。