詳細介紹
細胞名稱 人低分化鼻咽癌細胞株;CNE2-S18培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 10%FBS
傳代方法 無
傳代情況 1:
3傳代,3-4天傳1次
凍存條件 C5
支原體檢測 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
STR 陰性
同工酶
染色體 未做
人低分化鼻咽癌細胞株;CNE2-S18培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
人低分化鼻咽癌細胞株;CNE2-S18培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人低分化鼻咽癌細胞株;CNE2-S18培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-NKR/Neurokin B receptor /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽-B受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-RAMP-1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
腦鈉素/利鈉肽抗體 Anti-BNP 0.1ml
Goat Anti-Chicken IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml
FAM20C 英文名稱: 胞外分泌型絲酸/蘇酸蛋白激酶FAM20C抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PPAR-delta/beta D型-過氧化酶活化增生受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-RAMP-1/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SCF/MGF(Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit 小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD10/CALLA/FITC 熒光素標(biāo)記CD10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E2F5 轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體 規(guī)格 0.1ml
PIV IgM 付流感病毒 IgM(間接法二步法)
PKM2 英文名稱: 小鼠抗酸激酶-M2抗體 0.1ml
alpha Defensin 1 英文名稱: 防御素α1/3抗體 0.1ml
Anti-CD10/CALLA/FITC 熒光素標(biāo)記CD10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TNFsR- II (Human Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 人壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T
4-Mar 英文名稱: 膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fbxw7/CDC4 Fbxw7蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
DHT ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
ABCB9 英文名稱: 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體9抗體 0.2ml
Anti-AD7C/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人低分化鼻咽癌細胞株;CNE2-S18培養(yǎng)I CTP (Rat Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP) ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-streptomycin 鏈霉素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat anti-human IgG whole serum 羊抗人IgG抗血清 規(guī)格 1ml
ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I 96T
nNOS 英文名稱: 一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型) 0.1ml
phospho-BACE1 (Ser498) 英文名稱: 磷酸化β分泌酶抗體 0.1ml
Anti-streptomycin 鏈霉素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml