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產(chǎn)品簡介
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞；K7M2wt[K7M2-WT]培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶咨詢！
詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞；K7M2wt[K7M2-WT]培養(yǎng)
形態(tài)特性
品牌 貼壁生長
特征特性 抗原表達(dá): CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產(chǎn)物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達(dá)顯示其骨家族細(xì)胞特
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞；K7M2wt[K7M2-WT]培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞；K7M2wt[K7M2-WT]培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-PARP/FITC 熒光素標(biāo)記多腺苷二磷酸多聚酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-human IgA/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗人IgAMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
人巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體 Anti-anti-HCMV PP65/HHV5 PP65 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
FMNL1 英文名稱： 成蛋白相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1418) 磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-human IgA/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗人IgAMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
Plant Vitamin A,VA ELISA Kit 植物維生素AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-DMBT1 /FITC 熒光素標(biāo)記抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cyclin B3 周期素B3抗體 規(guī)格 0.2ml
BSA/Cy5 熒光素Cy5標(biāo)記血清白蛋白 0.1ml
KCNH1 英文名稱： 鉀離子通道蛋白EAG1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh WISP39/FKBPL p21調(diào)控蛋白WISP39抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-DMBT1 /FITC 熒光素標(biāo)記抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Styk1 英文名稱： 絲酸/蘇酸/酪酸激酶STYK1抗體 0.2ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167) 英文名稱： 磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體 0.1ml
src原癌基因抗體 Anti-SRC 0.2ml
Anti-Tie2/FITC 熒光素標(biāo)記上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAP4(Ser1046) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml
ATF6(activating transcription factor 6) 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞；K7M2wt[K7M2-WT]培養(yǎng)IL-1 Beta (Rabbit Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 兔白介素1βMulti-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-CXCL5/ENA-78/FITC 熒光素標(biāo)記上皮中性粒細(xì)胞活化肽78抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DcR1 壞死因子配體超家族成員10C 規(guī)格 0.1ml
Bovine IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記IgG 0.1ml
Leptin 英文名稱： 瘦素抗體 0.1ml
沙丁胺醇單克隆抗體 小鼠單抗 0.2
Anti-CXCL5/ENA-78/FITC 熒光素標(biāo)記上皮中性粒細(xì)胞活化肽78抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞；K7M2wt[K7M2-WT]培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。