詳細介紹
小鼠成肌細胞;C2C12價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠成肌細胞;C2C12價格
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞株是Yaffe D, Saxel O建立的小鼠成肌細胞系的亞株。該細胞分化較快,可形成能收縮的微管,產(chǎn)生特異的肌肉蛋白。在骨形態(tài)形成蛋白(BMP-2)的作用下,該細胞可由成肌細胞分化為成骨細胞。檢測發(fā)現(xiàn)該細胞鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況
小鼠成肌細胞;C2C12價格貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
小鼠成肌細胞;C2C12價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-phospho-CaMK2a(pTyr231) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠等磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea IgM/Gold 金標記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
凝血酶原酶抗體/纖維介素蛋白/前凝血素抗體 Anti-fgl2 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
FOPNL 英文名稱: 胚胎干細胞相關蛋白FOPNL抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-STAT6(Thr645) 磷酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea IgM/Gold 金標記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
PKB (mouse) 小鼠蛋白激酶BMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ET-1 內皮素-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MSH Alpha 促黑細胞激素α抗體 規(guī)格 0.1ml
AOAb(Human Anti-Ovary Antibody,AOAb) ELISA Kit 人抗卵巢抗體 96T
SH2D3A 英文名稱: SH2結構域蛋白3A抗體 0.2ml
CD11b 英文名稱: 整合素αM抗體Integrin αM 0.1ml
Anti-ET-1 內皮素-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
sTRAIL ELISA Kit 大鼠可溶性壞死因子相關凋亡誘導配體 96T
PAX1 英文名稱: 配對盒基因1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Integrin alpha 4/CD49d 整合素α4抗體 規(guī)格 0.1ml
CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
C9orf139 英文名稱: 9號染色體開放閱讀框139抗體 0.2ml
Anti-MRP5/ABCC5 多藥耐藥相關蛋白5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
小鼠成肌細胞;C2C12價格(EGFR)ELISA Kit 大鼠表皮生長因子受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SUMO 1 類泛素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit 人癌易感蛋白2 96T
NDUFS7 英文名稱: 線粒體復合物NDUFS7蛋白抗體 0.2ml
BDH1 英文名稱: 3-羥丁酸脫氫酶抗體 0.2ml
Anti-SUMO 1 類泛素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml