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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！
詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一成年女性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1：
2傳代；5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-CD8/PE 熒光素藻紅蛋白標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
EGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Artemin抗體 Anti-ART 0.1ml
ZBTB25 英文名稱： 鋅指蛋白46抗體 0.2ml
DAP1 英文名稱： 死亡相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
EGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
USF-1(upstream stimulatory factor 1) 上游刺激因子1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Caspase-3(Active) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCNA-Proliferation Marker 增殖細(xì)胞核抗原抗體 規(guī)格 0.1ml
DKK3 Kit Human 人 DKK3 / Dkk-3 / REIC ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TMEM2L 英文名稱： 跨膜蛋白2樣蛋白抗體 0.2ml
CEBP Beta 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體 0.1ml
Anti-Caspase-3(Active) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP-1)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠α肌動(dòng)蛋白(α Actin)ELISA試劑盒，英文名：α Actin ELISA Kit人的兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠骨特性堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒，英文名：BALP ELISA KiISA Kit for Human T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒，英文名：E ELISA Kit人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠γ-氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒，英文名：GABA ELISA KiISA Kit for Human Monocyte differentiation antigen CD14小鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒，英文名：CREB ELISA Kit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠白細(xì)胞介素6(IL-6)ELISA試劑盒，英文名：IL-6 ELISA KiISA Kit for Human Protein deltex-1小鼠粘蛋白5B(MUC5B)ELISA試劑盒，英文名：MUC5B ELISA Kit
人含蛋白2激進(jìn)的S-腺苷甲硫氨酸域(RSAD2)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒，英文名：IL-10 ELISA KiISA Kit for Human Endoglin小鼠微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)ELISA試劑盒，英文名：MGST1 ELISA KiISA Kit for Human Heparin-binding growth factor 2小鼠巰基丙酮酸硫轉(zhuǎn)移酶(MPST)ELISA試劑盒，英文名：MPST ELISA KiISA Kit for Human Gastrin小鼠激肽釋放酶4(KLK4)ELISA試劑盒，英文名：KLK4 ELISA KiISA Kit for Human 10 kDa heat shock protein, mitochondrial小鼠防御素β2(DEFβ2)ELISA試劑盒，英文名：DEFβ2 ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-22小鼠白介素27(IL27)ELISA試劑盒，英文名：IL27 ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-15小鼠CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒，英文名：CD40L ELISA Kit
山羊抗大鼠 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美國Jackson公司分裝
VAT1 英文名稱： 嗜鉻顆粒胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DAP12 英文名稱： 自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體 0.1ml
Anti-ATH III 凝血酶Ⅲ抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM培養(yǎng)VEGF-C ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti- Gamma-Adaptin/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM82A1/RMD2 微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml
8-OHdG(Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine) ELISA Kit 小鼠8羥基脫氧鳥苷 96T
Myocardin 英文名稱： 促血管平滑肌細(xì)胞分化因子抗體 0.2ml
Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198) 英文名稱： 磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體 0.1ml
Anti- Gamma-Adaptin/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白γ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMYM培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。