酶ⅠNAD(H)可見(jiàn)分光光度法公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：Gentamicin/OVA 慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白 2mgTetracycline/BSA 四環(huán)素偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgGentamicin/FITC 熒光素標(biāo)記慶大霉素 1ml

商品屬性：

商品介紹：

測(cè)定意義

輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要?dú)涫荏w，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時(shí)，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。

測(cè)定原理

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過(guò)PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測(cè)吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測(cè)。

需自備的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。

試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍(lán)綠色之前均可使用。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支（EP管中），2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。

粗酶液提取：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，4℃、8000g離心10min，取上清液待測(cè)。

2. 細(xì)菌或細(xì)胞：按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血液可直接測(cè)定，或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。

Cerberus蛋白(CER)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Cerberus (CER)    96T    Mus musculus (Mouse)

HtrA酸肽酶4(HTRA4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4)    96T    Homo sapiens (Human)

紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Erythropoietin (EPO)    96T    Rattus norvegicus (Rat)

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)    96T    Mus musculus (Mouse)

組蛋白H4(H4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Histone H4 (H4)    96T    Mus musculus (Mouse)

半乳糖凝集素9(GAL9)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Galectin 9 (GAL9)    96T    Homo sapiens (Human)

補(bǔ)體成分5a(C5a)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Complement Component 5a (C5a)    96T    Rattus norvegicus (Rat)

雌激素受體β(ERβ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Estrogen Receptor Beta (ERb)    96T    Homo sapiens (Human)

氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP)    96T    Canis familiaris; Canine (Dog)

Ⅰ型前膠原羧基端原肽(PⅠCP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Procollagen I C-Terminal Propeptide (PICP)    96T    Homo sapiens (Human)

血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1)    96T    Mus musculus (Mouse)

分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Secretory Immunoglobulin A (sIgA)    96T    Bos taurus; Bovine (Cattle)

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Transthyretin (TTR)    96T    Homo sapiens (Human)

生長(zhǎng)分化因子11(GDF11)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11)    96T    Homo sapiens (Human)

C4結(jié)合蛋白β(C4BPβ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for C4 Binding Protein Beta (C4BPb)    96T    Homo sapiens (Human)

補(bǔ)體因子P(CFP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Complement Factor P (CFP)    96T    Homo sapiens (Human)

生長(zhǎng)分化因子11(GDF11)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11)    96T    Mus musculus (Mouse)

核因子κB受體激活因子配基(RANκL)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)    CLIA Kit for Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B Ligand (RANkL)    96T    Rattus norvegicus (Rat)

Tetracycline/OVA  四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白     2mg

Oxytetracycline/BSA  土素偶聯(lián)牛血清白蛋白     2mg

Oxytetracycline/OVA  土霉偶聯(lián)雞卵白蛋白     2mg

streptomycin/OVA  鏈素偶聯(lián)血藍(lán)蛋白     5mg

Penicillin G/BSA  青G偶聯(lián)牛血清白蛋白     2mg

Penicillin G/OVA  青霉素G偶聯(lián)雞卵白蛋白     2mg

酶ⅠNAD(H)可見(jiàn)分光光度法streptomycin/BSA  鏈素偶聯(lián)牛血清白蛋白     2mg

streptomycin/OVA  鏈霉偶聯(lián)雞卵白蛋白     10mg

測(cè)定步驟：

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。

3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸餾水，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 對(duì)照管：取EP管，加入4μL上清液，40μL蒸餾水，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。

6. 測(cè)定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL試劑二，40μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四120μL，混勻后于510nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。

其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管，測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。