詳細(xì)介紹
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 熒光法 | YS-01S6425 |
商品介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研測定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guān)。
正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。
因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。
測定原理:
熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。
需自備的儀器和用品:
多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。
粗酶液提?。?/span>
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測。
2. 細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 血液可直接測定,或者適當(dāng)稀釋后測定。
測定步驟:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
6. 測定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個(gè)樣均需做。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
人角膜鎖鏈蛋白(CDSN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒多主葡萄殼Phospho-ULK1 (Ser638) (D8K9O) Rabbit mAb
人接觸蛋白1(CNTN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒短密青霉Color-coded Prestained Protein Marker
人接觸蛋白2(CNTN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉SimpleChIP® DNA Purification Buffers and Spin Columns
人接觸蛋白3(CNTN3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒香菇SGLT2 Antibody
人接觸蛋白4(CNTN4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb (IHC Formulated)
人接觸蛋白相關(guān)蛋白1(CNTNAP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒釀酒酵母N-Cadherin (13A9) Mouse mAb
人接觸蛋白相關(guān)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒梨輪紋病CYP11A1 (D8F4F) Rabbit mAb
人接頭蛋白2(ELMO2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Biotinylated)
人結(jié)蛋白(Des)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 草分枝桿Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb
人結(jié)構(gòu)特異性識別蛋白1(SSRP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒線殼囊孢(座線孢)Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb
人結(jié)合珠蛋白(HP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 百脈根中間根瘤Phospho-Rad50 (Ser635) Antibody
人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 煙色齒耳Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Biotinylated)
人骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒櫟Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (PE Conjugate)
人轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TNPO2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒反硝化鹽單胞SimpleChIP® Chromatin IP Buffers
人線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒薄層屬UBE2C Antibody
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)熒光法載脂蛋白O抗體Human JAML ELISA Kit旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human JAKMIP2(Janus kinase and microtubule-interacting protein 2) ELISA Kit2216E瓊脂
共濟(jì)失調(diào)性眼球運(yùn)動(dòng)功能喪失相關(guān)蛋白AOA1抗體Human JAM2 ELISA Kit多粘素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)
三號染色體開放閱讀框抗體Human KANK2 ELISA Kit血瓊脂基礎(chǔ) 分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶抗體Human KANK2 ELISA Kit細(xì) L型分離瓊脂用于L型細(xì)分離培養(yǎng)
磷酸化水通道蛋白2抗體Human JAM2 ELISA KitL-亮氨酸
ADP核糖基化因子1抗體Human JAML ELISA KitL-精氨酸L-谷氨酸鹽
乙型肝炎病X相關(guān)蛋白2抗體Human JIP1 ELISA Kit人柯薩奇病IgM(Cox V-IgM)ELISA試劑盒,Cox V-IgM ELISA