詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作:?
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
蜂房小甲蟲PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)口 | Aethina tumidaPCR | PCR檢測(cè)試劑盒 |
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
鮭降鈣雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 20mg
鈣三標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 32222-06-3 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 10mg
骨化三溶液標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 32222-06-3 Calcitriol Solution 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 5ml
醋鈣標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 62-54-4 Calcium Acetate (AS) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1g
壞血鈣標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 5743-28-2 Calcium Ascorbate 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 200mg
碳鈣標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 471-34-1 Calcium Carbonate (AS) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1g
化鈣標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 10035-04-8 Calcium Chloride (AS) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1g
葡庚糖鈣標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 29039-00-7 Calcium Gluceptate 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 200mg
KNG1 Others Human 人 KNG1 / BDK / Kininogen-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
KIAA1279 Others Human 人 KIAA1279 桿狀病-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA 淋巴瘤細(xì)胞,P388D1細(xì)胞 IF細(xì)胞,兔成骨C細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]
小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-0311028-71-0高端化學(xué)試孤兒酶2(PHOSPHO2)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
11028-71-0高端化學(xué)試核仁蛋白12(NOL12)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
11028-71-0高端化學(xué)試甘油激酶5(GK5)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
11028-71-0高端化學(xué)試甘油變位酶5(PGAM5)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
53597-25-4高端化學(xué)試93kDa核孔蛋白(NUP93)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
53597-25-4高端化學(xué)試ATM交互子(ATMIN)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
53597-25-4高端化學(xué)試Limkainβ1蛋白(LKAP)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
51005-14-2高端化學(xué)試Marapsin 2蛋白(MPN2)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
51005-14-2高端化學(xué)試視黃脫酶15(RDH15)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
51005-14-2高端化學(xué)試Penguin蛋白(PEN)檢測(cè)試盒(酶免疫吸附試驗(yàn)法)
蜂房小甲蟲PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)口原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。