詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 |
沙門(mén)氏菌SPP-spec核酸檢測(cè)試劑盒 | 50次 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
相關(guān)產(chǎn)品
鮑氏不動(dòng)桿菌(鮑曼不動(dòng)桿菌)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒Acinetobacter baumannii
魯氏不動(dòng)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒Acinetobacter lwoffi
不動(dòng)桿菌屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒Acinetobacter spp.
枝頂孢霉探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒Acremonium strictum
伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒Actinobacillus actinomycetemcomitans
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專(zhuān)用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人抗原提呈關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)ELISA試劑盒Human Transporter Associated With Aigen Processing(TAP)ELISA Kit
人抗原肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAP1)ELISA試劑盒Human Aigen Peptide Transporter 1(TAP1)ELISA Kit
人抗乙suan受體抗體(Ai-AChR)ELISA試劑盒Human Ai-Acetylcholine Receptor Aibody(Ai-AChR)ELISA Kit
人抗藥蛋白(SRI)ELISA試劑盒Human Sorcin(SRI)ELISA Kit
人抗脫氧核糖核suanmeiB(Ai-DNaseB)ELISA試劑盒Human Ai-Deoxyribonuclease B Aibody(Ai-DNaseB)ELISA Kit
人抗突觸前膜受體抗體(PsmRAb)ELISA試劑盒Human Ai-Presynaptic Membrane Receptor Aibody(PsmRAb)ELISA Kit
人抗糖脂抗體(AGA)ELISA試劑盒Human Ai-Glycolipid Aibody(AGA)ELISA Kit
人抗髓過(guò)氧化物mei抗體(Ai-MPO)ELISA試劑盒Human Ai-Myeloperoxidase Aibody(Ai-MPO)ELISA Kit
人抗絲聚蛋白(AFA)ELISA試劑盒Human Ai-Filaggrin Aibody(AFA)ELISA Kit
人抗生長(zhǎng)激su抗體(Ai-GHAb)ELISA試劑盒Human Ai-Growth Hormone Aibody(Ai-GHAb)ELISA Kit
沙門(mén)氏菌SPP-spec核酸檢測(cè)試劑盒腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白6(TNFαIP6)ELISA試劑盒Mouse Tumor Necrosis Factor Alpha Induced Protein 6(TNFaIP6)ELISA Kit
中性粒細(xì)胞明膠mei關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒Mouse Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin(NGAL)ELISA Kit
中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)ELISA試劑盒Mouse Neutrophil Activating Protein 3(NAP3)ELISA Kit
中性粒細(xì)胞彈性蛋白mei(ELA2)ELISA試劑盒Mouse Elastase 2, Neutrophil(ELA2)ELISA Kit