詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 人Nucleostemin基因PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | |
規(guī)格 | 50次 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
相關(guān)產(chǎn)品:
大鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒Rat Leukemia Virus(RaLV)RTPCR
真鯛虹彩病毒PCR檢測試劑盒Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)(PCR
赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測試劑盒Redspotted Grouper Nervous Necrosis Virus(RGNNV)RTPCR
鮭腎桿菌PCR檢測試劑盒Renibacterium salmoninarumPCR
呼吸道合胞病毒PCR檢測試劑盒Respiratory Syncytial Virus(RS?
注意事項:
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
人NADH脫氫mei4(ND4)ELISA試劑盒Human NADH Dehydrogenase 4(ND4)ELISA Kit
人NADH脫氫mei3(ND3)ELISA試劑盒Human NADH Dehydrogenase 3(ND3)ELISA Kit
人NADH脫氫mei2(ND2)ELISA試劑盒Human NADH Dehydrogenase 2(ND2)ELISA Kit
人M-期磷蛋白9(MPHOSPH9)ELISA試劑盒Human M-Phase Phosphoprotein 9(MPHOSPH9)ELISA Kit
人M-期磷蛋白8(MPHOSPH8)ELISA試劑盒Human M-Phase Phosphoprotein 8(MPHOSPH8)ELISA Kit
人M-期磷蛋白6(MPHOSPH6)ELISA試劑盒Human M-Phase Phosphoprotein 6(MPHOSPH6)ELISA Kit
人M-期磷蛋白10(MPHOSPH10)ELISA試劑盒Human M-Phase Phosphoprotein 10(MPHOSPH10)ELISA Kit
人Myoferlin蛋白(MYOF)ELISA試劑盒Human Myoferlin(MYOF)ELISA Kit
人MYC關(guān)聯(lián)因子X(MAX)ELISA試劑盒Human MYC Associated Factor X(MAX)ELISA Kit
人MutY同源物(MUTYH)ELISA試劑盒Human MutY Homolog(MUTYH)ELISA Kit
人Nucleostemin基因PCR檢測試劑盒抗PL12抗體(Ai-PL12)ELISA試劑盒Human Ai-PL12 Aibody
抗P62抗體(AP62A)ELISA試劑盒Human Ai-P62 Aibody(AP62A)ELISA Kit
抗OJ抗體(Ai-OJ)ELISA試劑盒Human Ai-OJ Aibody
抗Jo1抗體(Ai-Jo1)ELISA試劑盒Human Ai-Jo1 Aibody