詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒 | Madurella spp.PCR | 50次 |
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品:
臂板蛋白3A檢測試劑盒 Sema 3A ELISA KitSema 3A ELISA Kit
吡哆醛/吡哆醇維生suB6磷suanmei檢測試劑盒 PDXP ELISA Kitpyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase,PDXP ELISA Kit
吡哆醛/吡哆醇維生suB6激mei檢測試劑盒 PDXK ELISA Kitcaspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA Kit
鼻咽癌檢測試劑盒 NPC ELISA Kitnasopharyngeal carcinoma,NPC ELISA Kit
鼻病毒檢測試劑盒 IgA ELISA Kitrhinovirus(RV)aibody(IgA)ELISA kit
苯丙suan諾龍/苯丙suan去檢測試劑盒 NP ELISA KitNandrolone Phenylpropionate,NP ELISA Kit
本周蛋白檢測試劑盒 BJP ELISA KitBence-Jones protein,BJP ELISA Kit
胞質(zhì)動力蛋白檢測試劑盒 CD ELISA Kitcytoplasmic dynein,CD ELISA kit
胞漿型磷脂meiA2-α檢測試劑盒 cPLA2-α ELISA Kitcytosolic phospholipase A2-α,cPLA2-α ELISA Kit
胞漿免疫球蛋白檢測試劑盒 CIg ELISA Kitcytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit
馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒Pig lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit
脂蛋白脂mei(LPL)ELISA試劑盒Pig lipoprotein lipase,LPL ELISA kit
脂蛋白磷脂meiA2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒Pig lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit
脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒Porcine lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。