詳細(xì)介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:漢坦病毒IgM抗體ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Hantaan virus antibody IgM
檢測范圍:0.375ng/mL~12ng/mL
貨號:YS-E98560
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
Phospho-CD18 (Thr758)補體C4b-A蛋白抗體 SEMA4C ELISA Kit 信號素4C(SEMA4C)ELISA試劑盒
Phospho-CD18 (Ser756)磷酸化整合素β2/Integrin β2抗體 SEMA4B ELISA Kit 信號素4B(SEMA4B)ELISA試劑盒
C4orf28磷酸化整合素β2/Integrin β2抗體 SEMA4A ELISA Kit 信號素4A(SEMA4A)ELISA試劑盒
CATSPER24號染色體開放閱讀框28抗體 SEMA3G ELISA Kit 信號素3G(SEMA3G)ELISA試劑盒
CATSPER3陽離子通道相關(guān)蛋白2抗體 SEMA3F ELISA Kit 信號素3F(SEMA3F)ELISA試劑盒
Chorein/VPS13A陽離子通道相關(guān)蛋白3抗體 SEMA3E ELISA Kit 信號素3E(SEMA3E)ELISA試劑盒
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CHRAC1鈣調(diào)磷酸酶B相關(guān)蛋白2抗體 SEMA3B ELISA Kit 信號素3B(SEMA3B)ELISA試劑盒
CHD9CHRAC1蛋白抗體 SEMA3A ELISA Kit 信號素3A(SEMA3A)ELISA試劑盒
CXorf6ATP依賴的解螺旋酶抗體 SLAMF7 ELISA Kit 信號淋巴細(xì)胞激活分子家族成員7(SLAMF7)ELISA試劑盒
CHSS2X染色體開放閱讀框6抗體 STAT6 ELISA Kit 信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)ELISA試劑盒
CHST10硫酸軟骨素酶2抗體 STAT5B ELISA Kit 信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5B(STAT5B)ELISA試劑盒
CHST11碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶10抗體 STAT5A ELISA Kit 信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5A(STAT5A)ELISA試劑盒
CHST12碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶11抗體 STAT4 ELISA Kit 信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)ELISA試劑盒
CHST13碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶12抗體 STAT3 ELISA Kit 信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)ELISA試劑盒
漢坦病毒IgM抗體ELISA檢測試劑盒牛肝顆粒100g同肝湯配套使用
麥芽汁培養(yǎng)基 250g 用于酵母菌的增菌培養(yǎng)
CD63 ProteinRat重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (His 標(biāo)簽)
胰蛋白胨水培養(yǎng)基250g用于靛基質(zhì)試驗
頭孢丙稀 英文名稱:Cephalosporin propylene 規(guī)格:100mg 保存:-20℃,避光
XPNPEP2 ProteinHuman重組人 XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
葡萄糖肉湯 250g 用于細(xì)菌培養(yǎng),特別是檢測一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌(GB15979-2002)及檢測腸桿菌產(chǎn)氣。
凝乳酶 英文名稱:Rennet 規(guī)格:35mg/支 保存:-20℃,避光
丹參 英文名稱:Salvia miltiorrhiza 規(guī)格:1g 保存:-20℃,避光
升麻素苷 英文名稱:Prim-o-glucosylcimifugin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,避光
蔗糖胰蛋白胨肉湯200用于致病性嗜水氣單胞菌斑點酶聯(lián)免疫試驗
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI) 250g
前胡(白花前胡) 英文名稱:(Peucedanum praeruptorum) 規(guī)格:1g 保存:-20℃,避光
狼毒(月腺大戟) 英文名稱:Stellera chamaejasme (Euphorbia ebracteolata Hayata) 規(guī)格:4.0g 保存:-20℃,避光