詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
豬流感(SIV)核酸檢測試劑盒 | 50次 |
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
相關(guān)產(chǎn)品
對蝦白斑病毒(WSSV)核suan檢測試劑盒
傳染性對蝦皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)核suan檢測試劑盒
壞死性肝胰腺炎細(xì)菌(NHPB)核suan檢測試劑盒
斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)核suan檢測試劑盒
無乳鏈球菌(StA)核suan檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人1α(MEP1α)ELISA試劑盒Human Meprin A Alpha(MEP1a)ELISA Kit
人家族性地中海熱基因(MEFV)ELISA試劑盒Human Mediterranean Fever(MEFV)ELISA Kit
人加溶金屬蛋白mei1(MP1)ELISA試劑盒Human Pitrilysin Metalloproteinase 1(MP1)ELISA Kit
人加帽mei2(DCP2)ELISA試劑盒Human Decapping Enzyme 2(DCP2)ELISA Kit
人脊椎蛋白2(SPON2)ELISA試劑盒Human Spondin 2(SPON2)ELISA Kit
人脊椎蛋白1(SPON1)ELISA試劑盒Human Spondin 1(SPON1)ELISA Kit
人脊柱后側(cè)凸肽mei(KY)ELISA試劑盒Human Kyphoscoliosis Peptidase(KY)ELISA Kit
人己酮糖激mei(KHK)ELISA試劑盒Human Ketohexokinase(KHK)ELISA Kit
人己糖激mei2(HK2)ELISA試劑盒Human Hexokinase 2(HK2)ELISA Kit
人幾丁質(zhì)mei3樣蛋白2(CHI3L2)ELISA試劑盒Human Chitinase 3 Like Protein 2(CHI3L2)ELISA Kit
豬流感(SIV)核酸檢測試劑盒6酮前列腺su(6-K-PG)ELISA試劑盒Mouse 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit
5羥色胺受體2A(5-HTR 2A)ELISA試劑盒Mouse 5-Hydroxytryptamine receptor 2A,5HTR 2A ELISA Kit
5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒Mouse 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit
5羥基吲哚乙suan(5-HIAA)ELISA試劑盒Mouse 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA Kit