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          葡萄球菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-16 21:51:45瀏覽次數(shù):183

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
          應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
          英文名稱 Staphylococcusspp.PCR    
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          詳細(xì)介紹

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          產(chǎn)品特點(diǎn):

          ◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;

          ◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;

          ◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);

          ◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

          服務(wù)流程:

          公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          規(guī)格

          葡萄球菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒

          Staphylococcus spp.PCR

          50次

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          實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

          一、試劑準(zhǔn)備

          1. DNA模板

          2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

          3.10×PCR Buffer

          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

          5.Taq酶

          二、操作步驟

          1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

          10×PCR buffer             5μl

          dNTP mixl                 4μl

          引物1(10pM)               2μl

          引物2(10PM)              2μl

          Taq酶(2U/μl)            1μl

          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

          ddH2O至               50 μl

          PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

          2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

          3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

          4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

          三、注意事項(xiàng)

          1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

          2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

          3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。

          4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。

          5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

          6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

          7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

          PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

          方法

          1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

          10×PCR buffer

          5 μl     dNTP mix (2mM)

          4 μl     引物1(10pM)

          2 μl     引物2(10pM)

          2 μl     Taq酶 (2U/μl)

          1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

          1 μl      加ddH2O至 50 μl

          PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

          2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。

          3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

          4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          肌肌suan激mei(CKM)重組蛋白英文名稱:Recombina Creatine Kinase, Muscle (CKM)心腦血管

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          核糖核suanmeiT2(RNASET2)重組蛋白英文名稱:Recombina Ribonuclease T2 (RNASET2)腫瘤免疫

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