詳細(xì)介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:6酮前列腺素F1aELISA檢測試劑盒
英文名稱:6-keto-prostaglandin F1a
檢測范圍:25pg/ml~800pg/ml
貨號:YS-E98218
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
DUOX2雙氧化酶1/甲狀腺氧化酶1抗體 ERK1 ELISA Kit 細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1(ERK1)ELISA試劑盒
DUOXA1雙氧化酶2/甲狀腺氧化酶2抗體 EMMPRIN ELISA Kit 細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)ELISA試劑盒
DOCK7雙氧化酶成熟因子抗體 ECM1 ELISA Kit 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)ELISA試劑盒
DDIT4L胞質(zhì)分裂專一蛋白7抗體 CPR ELISA Kit 細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)ELISA試劑盒
DAP3DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 CYP7A1 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員7A1(CYP7A1)ELISA試劑盒
Defensin alpha 6死亡相關(guān)蛋白3抗體 CYP3A4 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)ELISA試劑盒
DBF4B防御素α6抗體 CYP2E1 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員2E1(CYP2E1)ELISA試劑盒
DCKS期激酶活化蛋白DBF4B抗體 CYP26A1 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)ELISA試劑盒
DHRS3脫氧胞苷激酶抗體 CYP24A1 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員24A1(CYP24A1)ELISA試劑盒
DNA Polymerase theta/POLH短鏈脫氫還原酶3抗體 CYP21B ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員21B(CYP21B)ELISA試劑盒
DENND2DDNA聚合酶θ/DNA pol θ抗體 CYP1B1 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員1B1(CYP1B1)ELISA試劑盒
Alpha DystroglycanDENN域內(nèi)含蛋白2D抗體 CYP1A2 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)ELISA試劑盒
phospho-DAG1 (Tyr892)肌相關(guān)蛋白DAG1抗體 CYP1A1 ELISA Kit 細(xì)胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)ELISA試劑盒
phospho-DAAM1 (Thr361)磷酸化肌相關(guān)蛋白DAG1抗體 COX4I1 ELISA Kit 細(xì)胞色素C氧化酶亞基Ⅳ亞型1(COX4I1)ELISA試劑盒
phospho-DOK1 (Tyr398)磷酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體 CYC1 ELISA Kit 細(xì)胞色素C1(CYC1)ELISA試劑盒
6酮前列腺素F1aELISA檢測試劑盒尤瑞克林 英文名稱:Yurek Lin 規(guī)格:1.6PNA單位/支 保存:-20℃,避光
SCGB3A1 ProteinHuman重組人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
裂霉素 英文名稱:Mitomycin 規(guī)格:25mg 保存:-20℃,避光
CD200R1 ProteinMouse重組小鼠 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Muller-kaufmann Tetrathionate Broth
HA ProteinH13N8重組甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
龍膽紫血瓊脂基礎(chǔ)250g用于鼠疫桿菌的選擇性培養(yǎng)
GP140 ProteinHIV重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group P, strain RBF168) (Fc 標(biāo)簽)
Yeast Extract Glucose Oxytetracycline Agar
桔梗 英文名稱:Chinese bellflower 規(guī)格:1g 保存:-20℃,避光
毛地黃素 英文名稱:Digoxin 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支 保存:-20℃,避光
阿利沙坦酯混合物 英文名稱:Ali candesartan ester mixture 規(guī)格:20mg 保存:-20℃,避光
IL35 ProteinHuman重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
唑來膦酸 英文名稱:Zoledronic acid 規(guī)格:100mg 保存:-20℃,避光