詳細(xì)介紹
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測定波長為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱:葡萄糖6磷酸(6PG)微量法
測試方法:微量法
規(guī)格 : 100管/48樣
貨號:YS-01S6668
測定意義
6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動(dòng)植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個(gè)底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲(chǔ)存起來。
測定原理:
6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測定吸光值。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)酶聯(lián)吸附測定試劑盒麥芽糖假絲酵母E2F4 (E3G2G) Rabbit mAb
大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(VF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒新月彎孢Phospho-SMC1 (Ser360) Antibody
大鼠維D結(jié)合蛋白(DBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黃孢平革Phospho-p53 (Ser15) (16G8) Mouse mAb (Biotinylated)
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/VWFCP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒腐皮殼CaMKIV Antibody
大鼠血管性血友病因子(VWF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒弗雷德里克斯堡假單胞Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
大鼠X-連鎖凋亡抑制蛋白(XIAP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒不吸水鏈霉CREB (48H2) Rabbit mAb (Biotinylated)
大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒寄生孢ROCK1 (C8F7) Rabbit mAb
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒巨大曲霉ROCK1 (C8F7) Rabbit mAb
大鼠α葡萄糖苷酶(α-Glu)酶聯(lián)吸附測定試劑盒禾粘座孢霉(或禾漆斑)HMGCS2 (D8B5M) Rabbit mAb
大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)酶聯(lián)吸附測定試劑盒鹽水鹽土生古Phospho-BCKDH-E1α (Ser293) (E2V6B) Rabbit mAb
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒豬丹絲KLF4 Antibody
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒栗疫KLF4 Antibody
大鼠糖脂轉(zhuǎn)移蛋白(GLTP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒波恩佩島蒼黃色桿INPP4b Antibody
大鼠生長分化因子6(GDF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒木霉Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
大鼠磷酸化Tau蛋白(pτ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒膠孢CD44 (156-3C11) Mouse mAb (Biotinylated)
葡萄糖6磷酸(6PG)微量法CD36抗體Human Pro-MMP-1(pro-Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit2′-脫氧胞苷鹽酸
固酮合成酶CYP11B2抗體Human pNF-H(Phosphorylated Neurofilament H) ELISA Kit4-甲基傘形酮酰-β-D-吡喃葡糖酸苷
7號染色體開放閱讀框16抗體Human PP(Pepsin) ELISA Kit硅酯H-295
10號染色體開放閱讀框62抗體Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒, IL-8/CXCL8 ELISA kit
胃癌多藥耐藥相關(guān)蛋白Human PP13(Placental Protein13) ELISA Kit人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生長 激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒, G
酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒, HELIX-Ⅱ ELISA kit
磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體Human Pro-MMP-10(Pro-Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit人麻疹?。∕V)ELISA試劑盒,MV ELISA KIT
磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體Human PPP1R1A(Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit人雌誘導(dǎo)蛋白PS2 ELISA試劑盒,
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。