化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
PCR基本操作：
原
?理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
布魯氏菌核酸熒光PCR檢測試劑盒（探針法） | 50T | PCR檢測試劑盒 |
實(shí)驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
布魯氏菌核酸熒光PCR檢測試劑盒（探針法）PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
黑木耳 Auricularia auricula青藤
醋胸肽β4 質(zhì)量>95%,BR Thymosin β4 Acetate
中國倉鼠肺細(xì)胞大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)
2--1,3-二化咪翁六酯(DFIH) 質(zhì)量>98%,BR 2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium hexafluorophosphate
平山正青 Eupenicillium hirayamae涇陽鏈 Streptomyces jingyangensis
芐索銨 質(zhì)量>97% Benzethonium Chloride
小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
肥胖抑制(大鼠) 質(zhì)量>97%,BR OBESTATIN (RAT)
費(fèi)氏中華根瘤 Sinorhizobium frediiPC-12(大鼠腎上嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)
β-淀粉樣蛋白(1-42),大鼠 質(zhì)量>95%,BR β-Amyloid Peptide (1-42), rat
NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)植物桿 Lactobacillus plantarum
血管緊張I 質(zhì)量>97%,BR,人，醋 Angiotensin I human acetate salt hydrate
地青 Penicillium arenicola苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
血管緊張III 質(zhì)量>97%,BR Angiotensin III,human
草菇 Volvariella bombycinaNIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)
蜂明肽; 蜂針液明肽 質(zhì)量BR,>97% Apamin phospho-JunB(Ser259)英文名稱：HIV1 p55 + p17遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1體
phospho-JMJD2B(Thr305)英文名稱：Hck免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE體
JIP2英文名稱：HEATR5B化蛋白激酶AKT1體
JIP3英文名稱：HIGD1B化蛋白激酶AKT1體
phospho-JNK1 + 2 + 3 (Thr183+Tyr185)英文名稱：Acetyl-Histone H4(K5)化蛋白激酶AKT1體
Phospho-Jak1 (Tyr1022 + Tyr1023)英文名稱：HSPB2醛脫酶2型體
JNK2英文名稱：HLA B27γ-丁醛脫酶體
JMY英文名稱：Protein atonal homolog 8衰老相關(guān)蛋白5體
原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
布魯氏菌核酸熒光PCR檢測試劑盒（探針法） | 50T | PCR檢測試劑盒 |
實(shí)驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
布魯氏菌核酸熒光PCR檢測試劑盒（探針法）PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
黑木耳 Auricularia auricula青藤
醋胸肽β4 質(zhì)量>95%,BR Thymosin β4 Acetate
中國倉鼠肺細(xì)胞大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)
2--1,3-二化咪翁六酯(DFIH) 質(zhì)量>98%,BR 2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium hexafluorophosphate
平山正青 Eupenicillium hirayamae涇陽鏈 Streptomyces jingyangensis
芐索銨 質(zhì)量>97% Benzethonium Chloride
小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
肥胖抑制(大鼠) 質(zhì)量>97%,BR OBESTATIN (RAT)
費(fèi)氏中華根瘤 Sinorhizobium frediiPC-12(大鼠腎上嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)
β-淀粉樣蛋白(1-42),大鼠 質(zhì)量>95%,BR β-Amyloid Peptide (1-42), rat
NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)植物桿 Lactobacillus plantarum
血管緊張I 質(zhì)量>97%,BR,人，醋 Angiotensin I human acetate salt hydrate
地青 Penicillium arenicola苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
血管緊張III 質(zhì)量>97%,BR Angiotensin III,human
草菇 Volvariella bombycinaNIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)
蜂明肽; 蜂針液明肽 質(zhì)量BR,>97% Apamin phospho-JunB(Ser259)英文名稱：HIV1 p55 + p17遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1體
phospho-JMJD2B(Thr305)英文名稱：Hck免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE體
JIP2英文名稱：HEATR5B化蛋白激酶AKT1體
JIP3英文名稱：HIGD1B化蛋白激酶AKT1體
phospho-JNK1 + 2 + 3 (Thr183+Tyr185)英文名稱：Acetyl-Histone H4(K5)化蛋白激酶AKT1體
Phospho-Jak1 (Tyr1022 + Tyr1023)英文名稱：HSPB2醛脫酶2型體
JNK2英文名稱：HLA B27γ-丁醛脫酶體
JMY英文名稱：Protein atonal homolog 8衰老相關(guān)蛋白5體
化工儀器網(wǎng)