詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 | Bacillus spp.PCR | 50次 |
相關(guān)產(chǎn)品
卡氏住白細(xì)胞原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒Leucocytozoon caulleryiPCR
沙氏住白細(xì)胞原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒Leucocytozoon sabrezisPCR
住白細(xì)胞原蟲(chóng)屬通用PCR檢測(cè)試劑盒Leucocytozoon spp.PCR
伊氏李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒Listeria ivanoviiPCR
單核細(xì)胞增生李斯特菌PCR檢測(cè)試劑盒Listeria monocytogenesPCR
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
N-乙酰半乳糖胺meiα(NAGa)重組蛋白英文名稱:Recombina N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
高分子量激肽原(HMWK)重組蛋白英文名稱:Recombina High Molecular Weight Kininogen (HMWK)血液病學(xué)
腦膜瘤表達(dá)抗原5(MGEA5)重組蛋白英文名稱:Recombina Meningioma Expressed Aigen 5 (MGEA5)腎標(biāo)志物
基質(zhì)金屬蛋白mei13(MMP13)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)腫瘤免疫
基質(zhì)金屬蛋白mei13(MMP13)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)腫瘤免疫
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鳥(niǎo)氨suan脫羧mei(ODC)重組蛋白英文名稱:Recombina Ornithine Decarboxylase (ODC)代謝通路
外核苷suan焦磷suanmei/磷suan二酯mei1(ENPP1)重組蛋白英文名稱:Recombina Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 1 (ENPP1)物種:Homo sapiens (Human,人)
肝sumei(HPSE)重組蛋白英文名稱:Recombina Heparanase (HPSE)物種:Homo sapiens (Human,人)
RNA核suan外切mei2同源物(REXO2)重組蛋白英文名稱:Recombina RNA Exonuclease 2 Homolog (REXO2)物種:Homo sapiens (Human,人)
芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒Human Matrix Metalloproteinase 2(MMP2)ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白mei2(MMP2)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Matrix Metalloproteinase 19(MMP19)ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白mei19(MMP19)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Matrix Metalloproteinase 17(MMP17)ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白mei17(MMP17)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Matrix Metalloproteinase 16(MMP16)ELISA Kit人基質(zhì)金屬蛋白mei16(MMP16)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T