詳細(xì)介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽ELISA檢測試劑盒
英文名稱:OATP1B1
檢測范圍:0.75ng/mL~24ng/mL
貨號:YS-E98112
性狀:盒狀液體。
實(shí)驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
注意事項:
1加樣:
①實(shí)驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實(shí)驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
優(yōu)點(diǎn):
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗體系,科研隊伍,良好的實(shí)驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
c-Maf19號染色體開放閱讀框46抗體 APOL5 ELISA Kit 載脂蛋白L5(APOL5)ELISA試劑盒
CACNA1A原癌基因cMAF抗體 APOL4 ELISA Kit 載脂蛋白L4(APOL4)ELISA試劑盒
CACH3電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體 APOL3 ELISA Kit 載脂蛋白L3(APOL3)ELISA試劑盒
CACH6L型鈣通道蛋白a1亞型3抗體 APOL2 ELISA Kit 載脂蛋白L2(APOL2)ELISA試劑盒
Cytochrome P450 2B6L型鈣通道蛋白a1亞型6抗體 APOH ELISA Kit 載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒
phospho-CTNNBIP1 (Ser36)細(xì)胞色素P450 2B6抗體 APOF ELISA Kit 載脂蛋白F(APOF)ELISA試劑盒
C20orf62磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 APOE ELISA Kit 載脂蛋白E(APOE)ELISA試劑盒
cIAP120號染色體開放閱讀框62抗體 APOD ELISA Kit 載脂蛋白D(APOD)ELISA試劑盒
C20orf27凋亡抑制因子1抗體 APOC4 ELISA Kit 載脂蛋白C4(APOC4)ELISA試劑盒
C1 Inactivator20號染色體開放閱讀框27抗體 APOC3 ELISA Kit 載脂蛋白C3(APOC3)ELISA試劑盒
CYP2W1酯酶抑制蛋白C1IN抗體 APOC2 ELISA Kit 載脂蛋白C2(APOC2)ELISA試劑盒
Choline dehydrogenase細(xì)胞色素P450 2W1抗體 APOC1 ELISA Kit 載脂蛋白C1(APOC1)ELISA試劑盒
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Cyclophilin B細(xì)胞因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1APOB100 ELISA Kit 載脂蛋白B100(APOB100)ELISA試劑盒
CT13親環(huán)蛋白PPIB抗體 APOB ELISA Kit 載脂蛋白B(APOB)ELISA試劑盒
有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽ELISA檢測試劑盒阿托伐他汀鈣 英文名稱:Methazolamide 規(guī)格:100mg 保存:-20℃,避光
新霉素 英文名稱:Neomycin 規(guī)格:200mg 保存:-20℃,避光
Bolton Selective Enrichment broth
一級目錄:顯色培養(yǎng)基 二級目錄:顯色培養(yǎng)基
HA ProteinH1N1重組甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Agar medium O(Baird-Parker agar)
吖啶黃素(2.5mg/支)1ml*5每支添加于100mlMFB培養(yǎng)基中
F11R ProteinHuman重組人 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SOC培養(yǎng)基250g用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
CNTN5 ProteinMouse重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 (His 標(biāo)簽)
托品醇(鹽酸托烷司瓊雜質(zhì)) 英文名稱:Tropine (tropisetron hydrochloride impurity) 規(guī)格:50mg 保存:-20℃,避光
沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)250g用于沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
甲苯胺藍(lán)-DNA酶平板9cm用于金黃色葡萄球菌核糖酸酶檢測
FCGR2 ProteinMouse重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)