詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6689 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
1,3-二溴烷 98%3,4,5-氧 98%大鼠清淀粉樣蛋白P(SAP)免疫試劑盒
2,6-二吡啶 97%1,2,4-三酐 97%大鼠清除受體富含半胱氨1型蛋白M130/CD163分子,CD163 免疫試劑盒
二烯基 98%3--2-甲基-1-烯 97%大鼠(HYD)免疫試劑盒
二烯 97%1,4-二乙基( PDEB ) GCS, ≥99.5% (GC) 大鼠羥甲基戊二單酰輔A還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒
1,3-二烷 98%1,4-二乙基 99%大鼠羥甲基戊二單酰輔A(HMG-CoA)免疫試劑盒
1,6-二己烷 99%甲基烯磺鈉 99%大鼠羥脯氨(Hyp)免疫試劑盒
二甲基二烯基 60%水溶液1,4-二羥基蒽 96%大鼠強(qiáng)啡肽(Dyn)免疫試劑盒
5-硝基 98%順式-烏頭 90%大鼠潛伏轉(zhuǎn)化生長因子結(jié)合蛋白1(LTBP1)免疫試劑盒
1,3- Standard for GC,≥99.5% (GC)順式-烏頭 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒
1,3- 分析標(biāo)準(zhǔn)品 ≥97% (HPLC)大鼠前列腺特異性抗原(PSA)免疫試劑盒
1,3- 98% 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%大鼠前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒
1,3- 99.5%次 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠前列腺H2(PGH2)免疫試劑盒
三烯基 97%中 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%大鼠前列腺F合成(PGFS)免疫試劑盒
2,3,5-三吡啶 99%硬脂鈣 Ca 6.6-7.4%大鼠前列腺F2α受體(PTGFR)免疫試劑盒
鎢粉 99.98% metals basis,1-5μm正癸 98%大鼠前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
油菜內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管冬綠 Gaultherin2-氨基-5-硝基-6-甲基吡啶CD3抗體
環(huán)黃芪醇 cycloastragenol2-氨基-5-硝基-6-甲基吡啶CP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體
蘋果脫氫2--4-吡啶電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體
金2--4-吡啶煙型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體
鉑片6-溴-2-甲基-3-硝基吡啶C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體
人白介2(IL-2)ELISA試劑盒, IL-2 ELISA kit6-溴-2-甲基-3-硝基吡啶γ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體
人抗乙型肝炎病表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒, HBsAb ELISA4-溴-2-甲基吡啶血小板因子4抗體
人丙諾龍/丙去(NP)ELISA試劑盒,NP ELISA4-溴-2-甲基吡啶血小板趨化因子7蛋白抗體
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。