詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 類天花病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Alastrim VirusPCR |
規(guī)格 | 50次 |
相關(guān)產(chǎn)品:
牛副流感病毒型PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Parainfluenza Virus 3(BPIV3)3RTPCR
牛細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Parvovirus (BPV)PCR
牛呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒Bovine ReovirusRTPCR
牛呼吸道合胞體病毒PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Respiartory Syncytial Virus(BRSV)RTPCR
牛鼻炎病毒型PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Rhinitis A Virus (BRAV)ARTPCR
注意事項(xiàng):
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
B-Raf原癌基因絲氨suan/蘇氨suan蛋白激mei檢測(cè)試劑盒 BRAF ELISA KitB-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase(BRAF)ELISA Kit
BMP激活su膜結(jié)合抑制因子同源物檢測(cè)試劑盒 BAMBI ELISA KitBMP And Activin Membrane Bound Inhibitor Homolog(BAMBI)ELISA Kit
Biopyrrin蛋白檢測(cè)試劑盒 BPn ELISA KitBiopyrrin(BPn)ELISA Kit
Bcl2樣蛋白11檢測(cè)試劑盒 BCL2L11 ELISA KitBcl2 Like Protein 11(BCL2L11)ELISA Kit
Bcl2拮抗/殺傷因子1檢測(cè)試劑盒 BAK1 ELISA KitBcl2 Aagonist/Killer 1(BAK1)ELISA Kit
Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3檢測(cè)試劑盒 BAG3 ELISA KitBcl2 Associated Athanogene 3(BAG3)ELISA Kit
Battenin蛋白檢測(cè)試劑盒 BTS ELISA KitBattenin(BTS)ELISA Kit
Bassoon蛋白檢測(cè)試劑盒 BSN ELISA KitBassoon(BSN)ELISA Kit
Axotrophin蛋白檢測(cè)試劑盒 AXOT ELISA KitAxotrophin(AXOT)ELISA Kit
Axis抑制蛋白2檢測(cè)試劑盒 AXIN2 ELISA KitAxis Inhibition Protein 2(AXIN2)ELISA Kit
類天花病毒PCR檢測(cè)試劑盒Human Colony Stimulating Factor 1, Macrophage(MCSF)ELISA Kit人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Macrophage Expressed Protein 1(MPG1)ELISA Kit人巨噬細(xì)胞表達(dá)基因1蛋白(MPG1)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Macro Creatine Kinase(MCK)ELISA Kit人巨肌suan激mei(MCK)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1(QSOX1)ELISA Kit人靜止suQ6硫基氧化mei1(QSOX1)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
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