詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
蜂房小甲蟲PCR檢測(cè)試劑盒 | Aethina tumidaPCR | 50次 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
相關(guān)產(chǎn)品
貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒Besnoitia besnoitiPCR
兩岐雙岐桿菌PCR檢測(cè)試劑盒Bifidobacterium bifidumPCR
長(zhǎng)雙歧桿菌PCR檢測(cè)試劑盒Bifidobacterium longumPCR
雙歧桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒Bifidobacterium spp.PCR
皮炎芽生菌PCR檢測(cè)試劑盒Blastomyces dermatitidisPCR
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AMP激活蛋白激meiγ3(PRKAg3)重組蛋白英文名稱:Recombina Protein Kinase, AMP Activated Gamma 3 (PRKAg3)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
suan脫氫mei激mei同工mei3(PDK3)重組蛋白英文名稱:Recombina Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 3 (PDK3)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
17-β-羥基類固醇脫氫mei12(HSD17b12)重組蛋白英文名稱:Recombina 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 12 (HSD17b12)物種:Homo sapiens (Human,人)
絲氨suan羥甲基轉(zhuǎn)移mei2(SHMT2)重組蛋白英文名稱:Recombina Serine Hydroxymethyltransferase 2, Mitochondrial (SHMT2)物種:Homo sapiens (Human,人)
絲氨suan/蘇氨suan激mei3(STK3)重組蛋白英文名稱:Recombina Serine/Threonine Kinase 3 (STK3)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
ⅡD組磷脂meiA2(PLA2G2D)重組蛋白英文名稱:Recombina Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D)代謝通路
肌球蛋白輕鏈激mei2(MYLK2)重組蛋白英文名稱:Recombina Myosin Light Chain Kinase 2 (MYLK2)物種:Homo sapiens (Human,人)
基質(zhì)金屬蛋白mei20(MMP20)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metalloproteinase 20 (MMP20)血液病學(xué)
絲氨suan蛋白mei12(PRSS12)重組蛋白英文名稱:Recombina Protease, Serine 12 (PRSS12)神經(jīng)科學(xué)
單氨氧化meiB(MAOB)重組蛋白英文名稱:Recombina Monoamine Oxidase B (MAOB)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
蜂房小甲蟲PCR檢測(cè)試劑盒Human Ai-Sa Aibody人抗Sa抗體(Ai-Sa)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Ai-PL7 Aibody人抗PL7抗體(Ai-PL7)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Ai-PL12 Aibody人抗PL12抗體(Ai-PL12)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T
Human Ai-P62 Aibody(AP62A)ELISA Kit人抗P62抗體(AP62A)ELISA試劑盒Human/人Elisa試劑盒48T