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          人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液

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          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2021-06-03 14:16:14瀏覽次數(shù):355

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          應(yīng)用領(lǐng)域 化工    
          人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

          詳細(xì)介紹

          人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
          產(chǎn)品名稱:人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液
          規(guī)格:100ml

          貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
          操作流程:
          1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
          1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
          1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
          1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
          1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
          1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
          1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
          1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
          Anti-NF-L/FITC 熒光素標(biāo)記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Anti-VSIG4 /FITC 熒光素標(biāo)記T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白之一抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體 Anti-ASCL1/MASH1 0.1ml

          Goat Anti-human IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml

          GPR37L1 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR37樣蛋白1抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh PRDX5/PRDX6 過氧化還原酶5/6抗體 規(guī)格 0.1ml

          Anti-VSIG4 /FITC 熒光素標(biāo)記T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白之一抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti-CCR-2B/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體2B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh ED-1 外胚層發(fā)育不良抗體 規(guī)格 0.1ml

          LTA (Human lymphotoxin Alpha,LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α 96T

          Myotrophin 英文名稱: 顆粒細(xì)胞分化蛋白抗體 0.2ml

          ADK 英文名稱: 腺苷酸激酶抗體 0.1ml

          Anti-CCR-2B/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體2B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          Rabbit IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔IgM 0.3ml

          lamin A + C 英文名稱: 核纖層蛋白A抗體 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Dog IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格 0.1ml

          Beta-Nph(Mouse Beta-naphthol) ELISA Kit 小鼠β萘酚Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

          氯霉素快速檢測卡 50T/盒 水產(chǎn)、蜂蜜、奶、奶粉

          Anti-ChRM1 /FITC 熒光素標(biāo)記毒蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          Anti-DAPK1/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Anti-Lxn(Latexin)/FITC 熒光素標(biāo)記羧肽酶抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh CAPD3/hCAP-D3 濃縮素2復(fù)合亞基D3抗體 規(guī)格 0.2ml

          Defensin Beta1 防御素β1抗原 0.5mg

          HGD 英文名稱: 尿黑酸氧化酶抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh SH2D2A 血管內(nèi)皮生長因子受體相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

          Anti-Lxn(Latexin)/FITC 熒光素標(biāo)記羧肽酶抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

           

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