詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞;2H7價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;2H7價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-MK1/ MAPKK 1/FITC 熒光素標記MK1/ MAPKK 1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TLR9/CD289/FITC 熒光素標記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H4(K16) 乙酰化組蛋白H4(K16)抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Gold 膠體金標記的兔抗生物素抗體IgG 0.5ml
GPR3 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Biotin/Cy3 Cy3標記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-TLR9/CD289/FITC 熒光素標記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MDA(Mouse malondialchehyche)ELISA Kit 小鼠丙二醛Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-cofilin/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠絲切蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DIS3L 有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit IgG/APC 熒光素APC標記兔IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
LPPR4 英文名稱: 腦特異性磷脂酸磷酸酶樣蛋白1抗體 0.2ml
馬杜霉素檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產(chǎn)/蜂蜜/奶
Anti-cofilin/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠絲切蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit 小鼠核因子κB受體活化因子配基 96T
PTPH1 英文名稱: 蛋白酪酸磷酸酶H1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGFR3/CD16 FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體 規(guī)格 0.1ml
ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性淋巴瘤激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
ChAT 英文名稱: ChAT膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體 0.1ml
Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser897) 磷酸化谷氨酸受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-DARPP32/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-LY-86/MD-1/FITC 熒光素標記MD-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CAP2 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體 規(guī)格 0.2ml
DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結(jié)直腸癌缺失基因抗原 0.5mg
HERC6 英文名稱: HERC6 E3泛素蛋白連接酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SGTA 小谷氨酰胺三角四肽重復區(qū)蛋白α抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-LY-86/MD-1/FITC 熒光素標記MD-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml