詳細介紹
小鼠結(jié)腸癌細胞;CT26.WT價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠結(jié)腸癌細胞;CT26.WT價格
形態(tài)特性 成纖維細胞
品牌 貼壁生長
特征特性 CT26 是以N-nitroso-N-methylurethane-(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細胞株。 它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT (ATCC CRL-2638)。 用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA) beta-半乳糖苷酶(beta-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT,得到致死的亞克隆CT26.CL25 (ATCC CRL-2639)。 即使CT26.CL25表達了典型的TAA beta-半乳糖苷酶,在
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Peptide YY/PYY/FITC 熒光素標(biāo)記酪酪肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgM/Gold 金標(biāo)記羊抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
雌激素受體α/β抗體 Anti-ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
FMDV Polyprotein (3A protein) 英文名稱: 口蹄疫病毒A型抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser235) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-human IgM/Gold 金標(biāo)記羊抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Plant Vitamin E,VE EELISA Kit 植物維生素EMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DMT1/FITC 熒光素標(biāo)記金屬離子轉(zhuǎn)運體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cyclin B2 周期素B2抗體 規(guī)格 0.1ml
Taurine/BSA 磺酸偶聯(lián)血清白蛋白(β-基乙磺酸) 1mg
Ki-67 英文名稱: Ki67蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh WISP1 Wnt1信號通路蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-DMT1/FITC 熒光素標(biāo)記金屬離子轉(zhuǎn)運體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Sulfatase 2 英文名稱: 酯酶2蛋白抗體 0.2ml
Fbx15 英文名稱: Fbx15蛋白抗體 0.2ml
髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 Anti-MAG-a/b 0.1ml
Anti-RGS2/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKA R2 (Ser96) 磷酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體 規(guī)格 0.1ml
IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-GSK-3 Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記葡萄糖合成激酶-3α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-P311 protein/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BCNP B淋巴細胞新型蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
BNP 腦鈉素(多肽抗原) 0.5mg
GSK3 alpha 英文名稱: 糖原合酶激酶3α抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RAD50 DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-P311 protein/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml