化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgE-497價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgE-497價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-PEG3/FITC 熒光素標(biāo)記PEG3蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-human Fibrinogen/Gold 金標(biāo)記羊抗人纖維蛋白原(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
原活化蛋白激酶1/2抗體 Anti-ERK2/ERK 0.1ml
Goat Anti-rat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.3ml
FBXW12 英文名稱： FBXW12蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser396) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-human Fibrinogen/Gold 金標(biāo)記羊抗人纖維蛋白原(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
RANTES 人趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CREB-1 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 規(guī)格 0.2ml
Rat Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit 大鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白 96T
TERT 英文名稱： 端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體 0.1ml
CEP164 英文名稱： 中心體蛋白CEP128抗體 0.1ml
Anti-CREB-1 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
TFR/CD71 ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 96T
Orexin receptor 1+2 英文名稱： 丘腦分泌素受體1+2/食欲素受體1+2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh GRM2/GLUR2 促代謝型谷氨酸受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
Human plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
phospho-Band3 (Tyr21) 英文名稱： 磷酸化紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 0.1ml
Anti-phospho-RUNX1(Ser303) 磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-phospho-GSK-3 Beta(Thr390) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PAF/FITC 熒光素標(biāo)記血小板活化因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BCL7B BCL7B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原) 0.5mg
gamma Synuclein 英文名稱： 核突觸蛋白-γ抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RAC2 G蛋白P21 RAC2抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-PAF/FITC 熒光素標(biāo)記血小板活化因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
化工儀器網(wǎng)