細胞名稱  小鼠抗人IgM雜交瘤細胞；mAbhIgM-491培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 半貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 保持細胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次

傳代情況

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類

小鼠抗人IgM雜交瘤細胞；mAbhIgM-491培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-SAMDC/AMD1/FITC 熒光素標記S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) 海葵神經(jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg

基質(zhì)金屬蛋白酶-3抗體 Anti-MMP-3 0.1ml

5-lipoxygenase activating protein 英文名稱： 5脂氧合酶激活蛋白抗體 0.2ml

FBXO39 英文名稱： XIAP相關因子1凋亡抑制蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PDGFRA(Tyr988) 磷酸化血小板源性生長因子受體α 規(guī)格 0.1ml

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) ?？窠?jīng)毒素(35肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg
RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維甲酸受體-β抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Bax BaxMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho C-Myc(Thr58/pSer62) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體 規(guī)格 0.1ml

Keratin14 濃縮液 0.1ml 進口分裝

UBE2J1 英文名稱： 泛素結合酶E2J1抗體 0.2ml

CHRAC1 英文名稱： CHRAC1蛋白抗體 0.1ml

Anti-Bax BaxMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Tgase 濃縮液 0.1ml 進口分裝

UEVLD 英文名稱： 泛素結合酶E2樣蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷酸化原活化蛋白激酶p38抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DIRC2 英文名稱： 干擾腎細胞癌蛋白2抗體 0.2ml

Anti-MASH1 神經(jīng)母細胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
FOXF1(Forkhead box protein F1) 叉頭蛋白F1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

ALDH7A1 ALDH7A1 兔單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

BCIP/NBT顯色試劑盒 50ml

ZNF471 英文名稱： 鋅指蛋白471抗體 0.2ml

DKK2 英文名稱： Wnt通路抑制因子2抗體 0.2ml

ALDH7A1 ALDH7A1 兔單抗 (FITC) Human
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。

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