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詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7912培養(yǎng)
形態(tài)特性 腹水型
品牌 體內(nèi)生長
特征特性 1979年12月建立，碘乙酸L7721瘤苗免疫組織經(jīng)103個活L7721細(xì)胞攻擊后，存活33日的615系病鼠脾細(xì)胞懸液或腹水，同系小鼠腹腔內(nèi)接種及傳代形成瘤株，接種*。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細(xì)胞懸液接種至615小鼠。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體 -
使用權(quán)限 A類
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7912培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-PAI-2/FITC 熒光素標(biāo)記纖溶酶原激活物抑制因子2抗體體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 1ml
周期素H抗體 Anti-Cyclin H 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
FAR1 英文名稱： 脂肪?；o酶A還原酶1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-VASP(Ser157) 磷酸化血管擴(kuò)張刺激磷蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 1ml
RNP-Ab(Human anti-ribonucleo protein Antibody) ELISA Kit 人抗核糖核蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-33/NFHEV 白介素33抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRP6 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格 0.2ml
cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit 人組織蛋白酶K 96T
phospho-c-Raf(Ser339) 英文名稱： 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.1ml
C14ORF140 英文名稱： 14號染色體開放閱讀框140抗體 0.2ml
Anti-IL-33/NFHEV 白介素33抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TIMP-2 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Utrophin 英文名稱： 肌營養(yǎng)不良蛋白相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體 規(guī)格 0.1ml
P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related) 增殖潛能相關(guān)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DHRS7C 英文名稱： 短鏈脫氫酶/還原酶家族7C抗體 0.2ml
Anti-Artemin Artemin抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-TTF-1 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GFAP 膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
AVP(Human arginine vasopressin) ELISA Kit 人精酸加壓素 96T
NHLRC1 英文名稱： 肌痙攣性癲癇病相關(guān)EPM2蛋白抗體 0.2ml
ADORA2B 英文名稱： 腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體 0.2ml
Anti-TTF-1 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
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