詳細介紹
人胰腺癌細胞;PANC-1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 人胰腺癌細胞;PANC-1價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于人的胰腺癌導管組織。1973年由Lieber 等建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:
3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN8
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:X;D8S1179:14, 15;D21S11:28
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-ROCK1 /FITC 熒光素標記Rho相關蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AACT protein(Alpha chymotrypsin protein) 胰糜蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 5mg
巨噬細胞克隆刺激因子抗體 Anti-M-CSF 0.1ml
Sclerostin 英文名稱: 骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體 0.2ml
FAM3C 英文名稱: 上皮分泌型FAM3C蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PIK3C3(Ser282) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 規(guī)格 0.1ml
AACT protein(Alpha chymotrypsin protein) 胰糜蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 5mg
SCF (Stem Cell Factor) 干細胞生長因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-BCHE (NT) 丁酰膽堿酯酶抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PHD1/prolyl hydroxylase 脯氨酰羥化酶抗體 規(guī)格 0.2ml
Hepatitis C Virus 濃縮液 0.1ml 進口分裝
UBE2 英文名稱: 泛素激活酶2(泛素激活酶E1相關蛋白抗體) 0.2ml
CD3E 英文名稱: CD3抗體 0.1ml
Anti-BCHE (NT) 丁酰膽堿酯酶抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
TNFRSF1A Kit Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A ELISA配對抗體 ELISA
Phospho-TSC2(Ser540) 英文名稱: 磷酸化結節(jié)性硬化蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh OTOA/DFNB22 耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體 規(guī)格 0.2ml
SPAG5/map126 相關抗原5(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CTDSPL 英文名稱: CTDSPL蛋白抗體 0.2ml
Anti-CD244 CD244抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-4(Human Interleukin 4) ELISA KIT 人白介素4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) 磷酸化生長因子受體結合蛋白10Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗IgG 規(guī)格 0.1ml
ASO(Human anti-streptolysin O) ELISA Kit 人抗鏈球菌溶血素O/抗O 96T
RIMS4 英文名稱: 神經元突觸膜胞外分泌調節(jié)蛋白4抗體 0.2ml
CIKS 英文名稱: 核因子NFκB激活蛋白1抗體 0.2ml
Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) 磷酸化生長因子受體結合蛋白10Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml