詳細介紹
人肝腹水腺癌細胞;SK-HEP-1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 人肝腹水腺癌細胞;SK-HEP-1價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 SK-HEP-1細胞系已被鑒定為內皮來源。 該細胞系為異倍體女性人(XX),染色體在亞三倍體范圍內。 在裸鼠中,它能形成與肝癌相*的大細胞癌。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-TFPI/LACI /FITC 熒光素標記組織因子途徑抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
抗蛇毒蛋白抗體 Anti-Snake poison Protein 0.2ml
Synaptopodin 英文名稱: 突觸足蛋白抗體 0.1ml
ETS2 英文名稱: 癌基因ETS2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAPKAPK5(Thr182) 磷酸化p38調節(jié)/激活蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Sox2 胚胎干細胞關鍵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-BOb-1 B細胞特異性轉錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PERK 蛋白激酶樣內質網激酶抗體 規(guī)格 0.2ml
c-jun 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TCF7L2 英文名稱: 轉錄因子7類似物2抗體 0.1ml
Phospho-cdc2 (Thr161) 英文名稱: 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml
Anti-BOb-1 B細胞特異性轉錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促甲狀腺素受體抗原 0.5mg
Integrin alpha 1 英文名稱: 整合素α1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh CHCHD2 丙型肝炎NS2反式調節(jié)蛋白/衰老相關的基因10蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-CAP2/FITC 熒光素標記環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh TMEM161A 跨膜蛋白161A抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-H1N1/FITC 熒光素標記抗流感病毒A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-SMMHC/MYH11/FITC 熒光素標記平滑肌肌球蛋白重鏈抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) /FITC 熒光素標記磷酸化蛋白質酪氨酸激酶JAK-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CCDC69 卷曲螺旋結構域蛋白69抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原 0.5mg
HPV18 E6 protein 英文名稱: 人類狀瘤病毒18 E6單克隆抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SNTG2/Syntrophin 5 肌蛋白結合蛋白γ2抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) /FITC 熒光素標記磷酸化蛋白質酪氨酸激酶JAK-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml