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詳細(xì)介紹
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；RL95-2價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；RL95-2價格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系源自一名65歲白人女性子宮內(nèi)膜腺癌組織，1983年由DL Way建系。該細(xì)胞表達α-角蛋白，細(xì)胞表面具有微絨毛。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C127
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長因子受體3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CD57抗體 Anti-CD57 0.1ml
SODD 英文名稱： Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體 0.2ml
ETL 英文名稱： EGF毒素受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GATA6(Tyr271) 磷酸化GATA結(jié)合蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長因子受體3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit 人特異性β1糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-PPIG (Ser376) 磷酸化親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Hemoglobin Beta 血紅蛋白β抗體 規(guī)格 0.2ml
BetaGD(Mouse Beta-glucuronidase) ELISA Kit 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶 96T
Phospholipase C beta 3 英文名稱： 磷酯酶Cβ3 0.1ml
phospho-Cyclin D3 (Thr283) 英文名稱： 磷酸化周期素D3抗體 0.1ml
Anti-Phospho-PPIG (Ser376) 磷酸化親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TSLP(Human thymic stromal lymphopoietin) ELISA Kit 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素 96T
MTCH1 英文名稱： 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白60(早老素相關(guān)蛋白) 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ephrin A3/EFNA3 酪氨酸蛋白激酶A3受體抗體 規(guī)格 0.1ml
PS ELISA Kit 小鼠磷脂酰絲氨酸Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
AUTS2 英文名稱： 孤獨癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關(guān)蛋白1) 0.2ml
Anti-BMP-7/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PKB(Mouse protein kinase B) ELISA Kit 小鼠蛋白激酶BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD45(LCA)/FITC 熒光素標(biāo)記CD45(白細(xì)胞共同抗原)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DRD4 多巴胺受體D4抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-GAD 谷酸脫羧酶抗體(間接法二步法) 96T
MMP-11 英文名稱： 基質(zhì)金屬蛋白酶11抗體 0.1ml
AATF 英文名稱： 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
Anti-CD45(LCA)/FITC 熒光素標(biāo)記CD45(白細(xì)胞共同抗原)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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