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詳細(xì)介紹
人膀胱癌細(xì)胞；BIU-87價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人膀胱癌細(xì)胞；BIU-87價格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 BIU-87建系于1989年（俞莉章等）。該細(xì)胞系來源于人膀胱乳狀移行上皮癌，通常采用5×108細(xì)胞0.2ml接種裸鼠皮下，呈進(jìn)行性腫瘤生長，腫瘤結(jié)節(jié)病檢與原標(biāo)本癌組織相似。22代細(xì)胞群體倍增時間為34小時。細(xì)胞能在軟瓊脂上生長，克隆形成率23%。BIU-87細(xì)胞系對ConA，WGA，PSL均有凝集反應(yīng)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C115
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-PILR Beta/FDFACT/FITC 熒光素標(biāo)記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
神經(jīng)生長因子-β抗體 Anti-NGF-β 0.1ml
Shiga-Like Toxin Type II Variant 英文名稱： 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體 0.2ml
ET-1 英文名稱： 內(nèi)皮素-1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 規(guī)格 0.1ml
5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-phospho-A Raf(Ser214) 磷酸化A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Periostin 成骨細(xì)胞特異性因子2抗體 規(guī)格 0.2ml
Chkl 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TORC2 英文名稱： CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 0.1ml
phospho-c-Abl (Tyr89) 英文名稱： 磷酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
Anti-phospho-A Raf(Ser214) 磷酸化A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
TTF-2(thyroid transcription factor 2;forkhead box E1) 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2(抗原) 0.5ml
JunB 英文名稱： 活化蛋白激酶B抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh COMMD7 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Protein C/FITC 熒光素標(biāo)記APC活化蛋白C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Tubulin-alpha 微管蛋白α抗體 Tubulin α 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化磷酯酶Cγ2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2) ELISA Kit 兔轉(zhuǎn)化生長因子β2Multi-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-Cyr61/FITC 熒光素標(biāo)記富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cytochrome P450 2D1 細(xì)胞色素CYP2D1抗體 規(guī)格 0.1ml
Anthrax Paper antigen 健康皮張?zhí)烤铱乖?1ml
LASS6 英文名稱： 長壽相關(guān)基因lASS6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ZNF268 鋅指脂蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Cyr61/FITC 熒光素標(biāo)記富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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