詳細介紹
人腎癌細胞;A498價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人腎癌細胞;A498價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞系由Aaronson S建立,源自一位52歲患有腎癌的女性病人。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA
傳代方法 1:3~1:8傳代;每周2次換液。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:26;D18S51:17;D19S433:18;D21S11:28,32;D2S1338:12;D3S1358:15;D5S818:11,13;D7S820:10,11;D8S1179:13,15;FGA:18,20;TH01:6,9.3;TPOX:8,10;vWA:8,11;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-T Beta10/FITC 熒光素標記胸腺素β10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta) 巨噬細胞炎性蛋白19抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
β-連環(huán)蛋白抗體(β鏈接素) Anti-β catenin/β-cats 0.1ml
Synaptogyrin 4 英文名稱: 神經(jīng)細胞囊泡循環(huán)蛋白4抗體 0.1ml
E Tag 英文名稱: E Tag標簽抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅) 規(guī)格 1ml
MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta) 巨噬細胞炎性蛋白19抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-A Raf/ARAF A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh peripherin 外周蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Chromogranin A 嗜鉻素 1:300 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TNF beta 英文名稱: 壞死因子β抗體(TNFβ) 0.1ml
Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 英文名稱: 磷酸化細胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 0.1ml
Anti-A Raf/ARAF A-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人C1q TNF相關(guān)蛋白-1(CTRP1/C1QTNF1)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒,英文名:TIMP-2 ELISA Kit人早期生長反應(yīng)因子1(Egr-1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)ELISA試劑盒,英文名:AGER ELISA Kit人脂肪酸去飽和酶2(FADS2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠鞘氨醇1磷酸酯裂解酶1(SGPL1)ELISA試劑盒,英文名:SGPL1 ELISA Kit人生長激素受體(GH receptor)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)ELISA試劑盒,英文名:MMP9 ELISA Kit人高遷移率族蛋白HMGI-C( High mobility group protein HMGI-C) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)ELISA試劑盒,英文名:TPT1 ELISA Kit人白介素36A(IL-36A)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)ELISA試劑盒,英文名:IL1RAP ELISA Kit人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠B-細胞激活因子受體(BAFFR)ELISA試劑盒,英文名:BAFFR ELISA Kit
ELISA Kit for Human Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)ELISA試劑盒,英文名:CALP ELISA Kit人白細胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1(LAIR1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒,英文名:iNOS ELISA Kit人甜菜堿高半胱氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/ml大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒,英文名:Cyclin-D1 ELISA Kit人黑色素瘤抗原T細胞1( MART-1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒,英文名:HSP-20 ELISA Kit人心房利鈉肽受體1(ANPRA)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒,英文名:sCD14 ELISA Kit人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒,英文名:Casp-8 ELISA Kit人早老素增強蛋白2 ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒,英文名:E3 ELISA Kit
考馬斯亮藍G-250溶液 100ml/500ml 自產(chǎn)
ZFP219 英文名稱: 鋅指蛋白219抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CRMP2 (Thr514) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 規(guī)格 0.1ml
KiSS-1R/GPR54/GPCR54(KiSS-1 receptor/G-Protein Coupled Receptor 54) G蛋白偶聯(lián)受體54抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DLC1 英文名稱: 胞漿動力蛋白輕鏈1抗體 0.2ml
PRDX6 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 鼠單抗 (FITC) Human
Anti-ANG-2/FITC 熒光素標記血管生成素-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-FANCD2(phospho Ser222) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化FANCD2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh COPS8 信號轉(zhuǎn)導蛋白亞基8抗體 規(guī)格 0.2ml
Acetyl CoA Carboxylase 乙酰輔酶A羧化酶 0.5mg
KCNQ1 英文名稱: 鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Tyrosine Hydroxylase(Neuronal Marker)/Tyk2/TYH 酪氨酸羥化酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-FANCD2(phospho Ser222) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化FANCD2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml