詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱(chēng) 人類(lèi)原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
品牌 懸浮生長(zhǎng),有1%~2%的細(xì)胞可輕微貼壁。
特征特性 該細(xì)胞于1988年建系;源于一名64歲患有急性粒細(xì)胞白血病(AML M7)的男性的骨髓;對(duì)多種細(xì)胞因子有反應(yīng)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;5-7u/ml Epo
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml,1:
2傳代,2~3天1次。
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:10,12;D18S51:14,17;D19S433:14,14.2;D21S11:31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8;D8S1179:11,15;FGA:23;TH01:6,9;TPOX:10;vWA:14,18,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
人類(lèi)原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
Anti- Alpha-AF/ Alpha-Afa/FITC 熒光素標(biāo)記α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 Anti-APNG/MPG 0.1ml
ZSWIM2 英文名稱(chēng): E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體 0.2ml
DUSP7 英文名稱(chēng): 雙特異性蛋白磷酸酶7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體 規(guī)格 0.1ml
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ATG1/ULK1/FITC 熒光素標(biāo)記自噬相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Factor XI 凝血因子11抗體 規(guī)格 0.2ml
MUC5AC(Mouse Mucin-5 subtype AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC 96T
MGMT 英文名稱(chēng): O6甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.1ml
ACCN1 英文名稱(chēng): 腦鈉通道蛋白1抗體 0.2ml
Anti-ATG1/ULK1/FITC 熒光素標(biāo)記自噬相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒,英文名:LIFR ELISA Kit人胞漿非特異性二肽酶(Cytosolic non-specific dipeptidase) ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠β防御素2(β-BD-2)ELISA試劑盒,英文名:β-BD-2 ELISA Kit人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒人96T4.69-300 pmol/L小鼠嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒,英文名:Eotaxin ELISA Kit人β-防御素129(β-DF129)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠載脂蛋白A4(APOA4)ELISA試劑盒,英文名:APOA4 ELISA Kit人電子傳遞黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒,英文名:DNASE1 ELISA Kit人肌動(dòng)蛋白束蛋白2(FSCN2)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)ELISA試劑盒,英文名:PKR1 ELISA Kit人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14)ELISA試劑盒,英文名:MMP14 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Cholesterol 7-alpha-monooxygenase小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)ELISA試劑盒,英文名:WNT10B ELISA Kit人亨廷頓蛋白(Huntingtin)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒,英文名:DPYD ELISA Kit人白介素17F(IL-17F)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)ELISA試劑盒,英文名:IL18BP ELISA Kit人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒,英文名:Bax ELISA Kit人包含蛋白1的 LETMD1結(jié)構(gòu)域(LETMD1) ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒,英文名:F-TESTO ELISA Kit人S腺苷甲硫氨酸合成酶同種型2(AdoMet synthase 2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒,英文名:Cyt-C ELISA Kit人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠趨化因子9(CXCL9)ELISA試劑盒,英文名:CXCL9 ELISA Kit
馬IgG干粉 10mg/50mg/100mg 國(guó)產(chǎn)
WDR91 英文名稱(chēng): WDR91蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CDK9 (Thr186) 磷酸化周期素依賴(lài)性激酶9抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DIP13B 英文名稱(chēng): DIP13β抗體 0.1ml
Anti-ACTH (18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ANG- II ELISA Kit 大鼠血管緊張素ⅡMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERp29 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體 規(guī)格 0.1ml
ACE II ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶 96T
MYOM1 英文名稱(chēng): 肌間蛋白1抗體 0.2ml
ARHI 英文名稱(chēng): 抑癌基因ras同源家族1抗體 0.2ml
Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml