詳細介紹
人前列腺癌細胞;LNCaP價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人前列腺癌細胞;LNCaP價格
形態(tài)特性 上皮樣;梭形
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞由Horoszewicz JS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結(jié)細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產(chǎn)生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長,所以傳代的時候要反復(fù)吹打形成單個細胞;該細胞貼壁不牢,達不到匯合狀態(tài),而且會使培養(yǎng)基迅速變酸;傳代后48h內(nèi)一定要保持培養(yǎng)瓶靜止.如果此時挪動培養(yǎng)瓶,會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況,需要重新孵育24~48h使細胞重新貼壁,細胞貼壁后可更換培養(yǎng)基。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;5~7天1次。
傳代情況 P50
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
同工酶
染色體 72~88,XY
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-factor VIII/PE 熒光素PE標記第八因子相關(guān)抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Egr-1(Early growth response 1) 早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
血管緊張素I抗體 Anti-Ang I/AT1 0.1ml
ZBTB2 英文名稱: 鋅指蛋白437抗體 0.2ml
DNER 英文名稱: 腦表皮生長因子跨膜蛋白DNER抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4E(Ser209) 磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體 規(guī)格 0.1ml
Egr-1(Early growth response 1) 早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCSK9/NARC1 神經(jīng)細胞凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體(前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9) 規(guī)格 0.1ml
C Kit Human 人 C / SLAMF2 / BCM1 ELISA配對抗體 ELISA
TCF12 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子12抗體 0.2ml
CD146 英文名稱: 黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體 0.1ml
Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人β-防御素129(β-DF129)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠載脂蛋白A4(APOA4)ELISA試劑盒,英文名:APOA4 ELISA Kit人卵固蛋白同族物1(Ovostatin homolog 1)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠活化素B(ACV-B)ELISA試劑盒,英文名:ACV-B ELISA Kit人前膠原C內(nèi)肽酶增強子1(PCPE1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)ELISA試劑盒,英文名:LDL-C ELISA KiISA Kit for Phylloquinone大鼠成纖維生長因子受體底物2(FRS2)ELISA試劑盒,英文名:FRS2 ELISA Kit大鼠α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)ELISA試劑盒,英文名:αHSP ELISA Kit大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA試劑盒,英文名:HSP90αA1 ELISA Kit豚鼠干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒,英文名:IFNα ELISA Kit
人電子傳遞黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒,英文名:DNASE1 ELISA Kit人腺苷高半胱(AdoHcyase)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA試劑盒,英文名:apo-B48 ELISA KiISA Kit for Human Interferon-inducible protein AIM2小鼠血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒,英文名:AT2R ELISA Kit人胎盤堿性磷酸酶(ALPP)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠瘦素(Leptin)ELISA試劑盒,英文名:Leptin ELISA KiISA Kit for Human Angiopoietin-1小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒,英文名:visfatin ELISA Kit人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒,英文名:TRAb ELISA KiISA Kit for Human Coiled-coil domain-containing protein 82小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)ELISA試劑盒,英文名:CASP-10 ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
VAMP2 英文名稱: 囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser602) 磷酸化B-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨細胞病毒UL49抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DOCK7 英文名稱: 胞質(zhì)分裂專一蛋白7抗體 0.2ml
Anti-AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit 人血管舒緩激肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖體S6蛋白激酶β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HRP2 肝癌衍生生長因子2抗體 規(guī)格 0.2ml
ABM-Ab(Human alveoli basement membrane zone antibody) ELISA Kit 人抗肺泡基底膜抗體 96T
PDGFAA + PDGFBB 英文名稱: 血小板源性生長因子AA+BB抗體 0.1ml
Connexin-29 英文名稱: 間隙連接蛋白29抗體 0.1ml
Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖體S6蛋白激酶β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml