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詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（彝族）；HYL價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞（彝族）；HYL價格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞來源于一彝族女性的外周血。1994年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1：
2傳代；5-6天一次
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Resistin/FITC 熒光素標(biāo)記抵抗素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
肺耐藥相關(guān)蛋白抗體 Anti-LRP/MVP 0.1ml
SNF5 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體 0.1ml
CT112 英文名稱： /抗原112抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷酸化丙酮酸激酶M2抗體 規(guī)格 0.1ml
PACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
UU-Ab(Mouse Ureaplasma urealyticum antibody) ELISA Kit 小鼠解脲脲原體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CK34 BetaE12/FITC 熒光素標(biāo)記高分子量角蛋白CK34βE12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DMTF1 周期素D相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit IgG/Biotin 生物素化兔IgG 0.1ml
LRSAM1 英文名稱： LRSAM1蛋白抗體 0.2ml
三聚氰胺檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產(chǎn)奶/奶粉等乳制品
Anti-CK34 BetaE12/FITC 熒光素標(biāo)記高分子量角蛋白CK34βE12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶2(CaM-kinase kinase 2)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)ELISA試劑盒，英文名：MBL ELISA Kit人α滑行蛋白(Alpha-taxilin)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)ELISA試劑盒，英文名：MMP8 ELISA Kit人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠丁酰膽堿酯酶(BCHE)ELISA試劑盒，英文名：BCHE ELISA Kit大鼠氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)ELISA試劑盒，英文名：NT-ProBNP ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒，英文名：IgE ELISA Kit人精氨基琥珀酸合成酶(Argininosuccinate synthase)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒，英文名：IGFBP-2 ELISA Kit人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(MPO-ANCA)ELISA試劑盒，英文名：MPO-ANCA ELISA Kit
ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 13小鼠半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)ELISA試劑盒，英文名：caspase-3 ELISA Kit人橋梁整合因子蛋白(BIN1) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒，英文名：PCK ELISA Kit人NADH細(xì)胞色素b5還原酶2(b5R.2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠核因子κB(NF-Kb)ELISA試劑盒，英文名：NF-Kb ELISA Kit人CC趨化因子受體7(CCR-7)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)ELISA試劑盒，英文名：ALT ELISA Kit人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒人96T1.56-100 U/ml小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒，英文名：E-Cad ELISA Kit脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(Deoxypyridinoline)ELISA試劑盒通用96T1.56-100 ng/mL小鼠10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒，英文名：IP-10/CXCL10 ELISA Kit內(nèi)毒素(Endotoxin)ELISA試劑盒通用96T0.01-1 EU/mL小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)ELISA試劑盒，英文名：VEGFR2 ELISA Kit
山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美國Jackson公司分裝
VEGF-A 英文名稱： 血管內(nèi)皮生長因子A 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷酸化細(xì)胞核因子/磷酸化k基因結(jié)合核因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DNA polymerase delta 英文名稱： DNA聚合酶γ抗體 0.2ml
Anti-APOD 載脂蛋白D抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit 人丙酮酸激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NIK/MAPKKK14 NFkB誘導(dǎo)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-16 白介素16抗體 規(guī)格 0.1ml
6-K-PG(Mouse 6-keto-prostaglandin) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素 96T
phospho-PAK6(Ser165) 英文名稱： 磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6 0.1ml
CPT1A 英文名稱： 肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1A抗體 0.1ml
Anti-NIK/MAPKKK14 NFkB誘導(dǎo)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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