詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;SL-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
人胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;SL-1培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit 人α平滑肌肌動(dòng)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-p58ipk p58ipk抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HSD3a 羥基類固醇脫氫酶3α抗體 規(guī)格 0.2ml
ACA(Human anti-centrol and centrosome antibody) ELISA Kit 人抗中性粒/中心體抗體 96T
Cerebral protein 4 英文名稱: 腦蛋白4抗體 0.2ml
CUG-BP1 英文名稱: 胞苷尿苷鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Anti-p58ipk p58ipk抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit 人維生素B12Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤生長(zhǎng)因子抗體(小鼠、大鼠、豬)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Hes5 發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子-5抗體 規(guī)格 0.2ml
ACA-IgG(Mouse anti-cardiolipin antibody IgG) ELISA Kit 小鼠抗心磷脂抗體IgG 96T
PON3 英文名稱: 對(duì)氧磷酶3抗體 0.2ml
CYP2S1 英文名稱: 細(xì)胞色素p450 2s1抗體 0.1ml
Anti-PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤生長(zhǎng)因子抗體(小鼠、大鼠、豬)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人胱天蛋白酶9(Caspase-9/MCH6/ICE-LAP6)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒,英文名:Col Ⅱ ELISA Kit人ATP敏感的內(nèi)向整流鉀通道10(KCNJ10)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒,英文名:5-HIAA ELISA Kit人層粘連蛋白β2(LAMβ2)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠胰蛋白酶原酶(Try)ELISA試劑盒,英文名:Try ELISA Kit人線粒體Poly(A)核糖核酸聚合酶(PAP)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒,英文名:DHEA-S7 ELISA Kit人髓磷脂少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒,英文名:FⅡ ELISA Kit人神經(jīng)降壓素/神經(jīng)調(diào)節(jié)肽N(Neurotensin/neuromedin N)ELISA試劑盒人96T1.56-100 pmol/L大鼠緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒,英文名:ZO1 ELISA Kit人表角質(zhì)蛋白(Periaxin)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠高半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒,英文名:Hcy ELISA Kit
人雙鏈核糖核酸特異腺苷脫氨酶(DSRAD)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(TGFβR1)ELISA試劑盒,英文名:TGFβR1 ELISA Kit人過(guò)氧化還原酶6(PRDX6) ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)ELISA試劑盒,英文名:HLA-DR ELISA Kit人前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠CD45分子(CD45)ELISA試劑盒,英文名:CD45 ELISA Kit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白質(zhì)D( PSP-D)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒,英文名:MUC1 ELISA Kit人突觸素(Synaptophysin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠頭蛋白(NOG)ELISA試劑盒,英文名:NOG ELISA Kit人鞘氨醇1磷酸酯受體2(S1PR2)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠內(nèi)皮素受體B(ETRB)ELISA試劑盒,英文名:ETRB ELISA Kit人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1/TLT-1)ELISA試劑盒人96T62.5-4000 pg/mL大鼠核連蛋白2(NUCB2)ELISA試劑盒,英文名:NUCB2 ELISA Kit
山羊抗豬 IgG(H+L)/HRP 0.1ml 美國(guó)Jackson公司分裝
VEGFB 英文名稱: 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Nm23(NDP Kinase A,NDPKA) 轉(zhuǎn)移抑制基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DBX2 英文名稱: 腦發(fā)育同源蛋白2抗體 0.2ml
Anti-phospho-APP/ABPP(Thr668) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶11Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Nanog 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-7Ra/CD127 白細(xì)胞介素-7受體a抗體 規(guī)格 0.2ml
5-NT ELISA Kit 大鼠5核苷酸酶 96T
PKA alpha + beta 英文名稱: 蛋白激酶A抗體 0.1ml
C1orf86 英文名稱: 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體 0.2ml
Anti-Nanog 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml