詳細(xì)介紹
人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1價(jià)格
形態(tài)特性 成肌細(xì)胞
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株, WPMY-1, 與RWPE-1 cells (ATCC CRL-11609)一樣,來(lái)源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。 通過(guò)一個(gè)pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu),用SV40大T抗原對(duì)基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。 WPMY-1細(xì)胞,與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣,屬于來(lái)源于同一個(gè)前列腺的一系列細(xì)胞株。 由于它們來(lái)源于同一個(gè)前列腺的周圍區(qū)域,WPMY-1細(xì)胞株對(duì)于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。 據(jù)提供者報(bào)道,來(lái)源于同一個(gè)前列腺的RWPE-1細(xì)胞株(ATCC CRL-1
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,5%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(41+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit 人糖化白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CXCL14 CXC趨化因子14抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GPSM1 G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
IP-10/CXCL10(Mouse interferon-inducible protein 10) ELISA Kit 小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10 96T
Cenexin1 英文名稱: 尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體 0.1ml
Phospho-Bcr (Tyr177) 英文名稱: 磷酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體 0.1ml
Anti-CXCL14 CXC趨化因子14抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VC(Mouse Vitamin C) ELISA Kit 小鼠維生素CMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CT DNA /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗小胸腺DNA 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DDIT4L DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml
KLH/APC 熒光素APC標(biāo)記血藍(lán)蛋白 0.1ml
Laminin alpha 5 英文名稱: 層粘蛋白α5抗體 0.1ml
磺胺*氧芐胺嘧啶單克隆抗體 小鼠單抗 0.2
Anti-CT DNA /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗小胸腺DNA 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人亨廷頓蛋白(Huntingtin)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒,英文名:DPYD ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-1 beta小鼠RAS基因家族成員RAB5A(RAB5A)ELISA試劑盒,英文名:RAB5A ELISA KiISA Kit for Human Kallikrein-*鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒,英文名:MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ ELISA KiISA Kit for Human Apolipoprotein(a)大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒,英文名:ADAMTS13/vWF-cp ELISA KiISA Kit for Human Mucin-7大鼠水閘蛋白1(Cldn1)ELISA試劑盒,英文名:Cldn1 ELISA KiISA Kit for Human Nuclear factor erythroid 2-related factor 1大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒,英文名:ANX-Ⅴ ELISA KiISA Kit for Human Oxysterols receptor LXR-beta大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒,英文名:MMP-9 ELISA Kit
人白介素17F(IL-17F)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)ELISA試劑盒,英文名:IL18BP ELISA KiISA Kit for Human Phosphoenolpyruvate carboxykinase [GTP], mitochondrial大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒,英文名:DPPⅣ ELISA KiISA Kit for Human Perilipin-2大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒,英文名:IL-18 ELISA KiISA Kit for Human Glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒,英文名:6-keto-PGF1a ELISA KiISA Kit for Human Secretogranin-3大鼠陽(yáng)離子氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(CAT2)ELISA試劑盒,英文名:CAT2 ELISA KiISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein C大鼠生長(zhǎng)抑素(SST)ELISA試劑盒,英文名:SST ELISA KiISA Kit for Thyroxine大鼠酪胺酸酶(TYR)ELISA試劑盒,英文名:TYR ELISA Kit
雙抗 100ml 國(guó)產(chǎn)
ZNF206 英文名稱: 鋅指蛋白206抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1197) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DCC 英文名稱: 結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體 0.1ml
銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體 Anti-ATP7A 0.1ml
Anti-SCN9A/NAV1.7/FITC 熒光素標(biāo)記電壓開(kāi)啟的鈉離子通道SCN9AIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ADM (Adrenomedullin)(22-42) 腎上腺髓質(zhì)素(22-42)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 Anti-MRP1 0.1ml
5-HTR3 英文名稱: 5-羥色胺受體3抗體 0.1ml
Fx1A 英文名稱: 腎刷狀緣抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體B抗體 規(guī)格 0.1ml
ADM (Adrenomedullin)(22-42) 腎上腺髓質(zhì)素(22-42)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg