詳細介紹
細胞名稱 人EB病毒轉化的B細胞;CGM1培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 EB轉染B細胞
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 1:
2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1) shank1多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD80/B7-1 刺激分子B7-1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh OXSR1 氧化應激反應蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
PTX3 Kit Human 人 PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-14 ELISA配對抗體 ELISA
CD70 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員7抗體 0.2ml
CCDC88B 英文名稱: 大腦亮酸拉鏈結構域蛋白抗體 0.2ml
Anti-CD80/B7-1 刺激分子B7-1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
VCAM-1/CD106 (Vascuolar cell adhesion molecule 1) 血管內皮細胞粘附分子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCNA 增殖細胞核抗原抗體 規(guī)格 0.1ml
IL18BP Kit Human 人 IL18BP / IL18BPa ELISA配對抗體 ELISA
TYK3 英文名稱: 酪酸蛋白激酶3抗體 0.2ml
CHK2 英文名稱: 細胞周期檢測點激酶2抗體 0.1ml
Anti-Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人肌肽酶1(CNDP1)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒,英文名:β-DF ELISA KiISA Kit for Human Wnt inhibitory factor 1大鼠白介素1受體Ⅰ(IL1R1)ELISA試劑盒,英文名:IL1R1 ELISA Kit大鼠CCAAT增強子結合蛋白β(CEBPβ)ELISA試劑盒,英文名:CEBPβ ELISA Kit豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒,英文名:LTD4 ELISA Kit人醛脫氫酶家族16成員A1(ALDH16A1)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶1(IDO1)ELISA試劑盒,英文名:IDO1 ELISA Kit人膜聯(lián)蛋白A6(ANXA6)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/ml小鼠天冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA試劑盒,英文名:AST ELISA Kit人B淋巴細胞白血病/淋巴瘤11B ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒,英文名:BGP/Gehrelin ELISA Kit
人心磷脂合成酶(CRLS1)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠生長分化因子15(GDF-15)ELISA試劑盒,英文名:GDF-15 ELISA Kit人小腦蛋白(Protein cereblon)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA試劑盒,英文名:cTnⅠ ELISA Kit人補體因子D(CFD)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠成纖維細胞生長因子6(FGF6)ELISA試劑盒,英文名:FGF6 ELISA Kit人半胱氨酸蛋白酶抑制劑3(CST3)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠P物質(SP)ELISA試劑盒,英文名:SP ELISA Kit人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒,英文名:IL-1β ELISA Kit人β-防御素14(β-DF14)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠血小板衍生生長因子B(PDGFB)ELISA試劑盒,英文名:PDGFB ELISA Kit人纖維母細胞生長因子20(FGF-20)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠絲氨酸棕櫚酰轉移酶長鏈堿性亞基1(SPTLC1)ELISA試劑盒,英文名:SPTLC1 ELISA Kit
胎血清(特優(yōu)級) 16000-044 500ml Gibco
ZNF350 英文名稱: 鋅指蛋白350/癌易感基因1結合蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EEF2k (Ser366) 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
FAK(Focaladhesin kinase) 粘著斑激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DMP1 英文名稱: 牙本質基質蛋白1抗體 0.2ml
TNF家族B細胞激活因子抗體 Anti-BAFF/CD257 0.1ml
Anti-Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC 熒光素標記磷酸化沉默調節(jié)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
一氧化氮合成酶-1抗體 Anti-NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS 0.1ml
5-HTR1B 英文名稱: 5-羥色胺受體1B抗體 0.1ml
FAM62B 英文名稱: 延伸突觸蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser9) 磷酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml
Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg