詳細(xì)介紹
人胚腎細(xì)胞-F克??;293F價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人胚腎細(xì)胞-F克??;293F價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長(zhǎng);懸浮生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件 懸浮培養(yǎng)用特制無(wú)血清培養(yǎng)基;貼壁培養(yǎng)用MEM-EBSS + NEAA + 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12,14;D16S539:,9,13;D18S51:17,18;D6S1043:11;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;Penta E:15;vWA:16,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-Calpain 1/FITC 熒光素標(biāo)記鈣蛋白酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-GTSE-1/FITC 熒光素標(biāo)記G2期、S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CHFR 泛素連接酶蛋白CHFR抗體 規(guī)格 0.2ml
USF-1(upstream stimulatory factor 1) 上游刺激因子1抗原 0.5mg
CD51 英文名稱: 整合素αV抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh TMPRSS5 跨膜絲氨酸蛋白酶5抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-GTSE-1/FITC 熒光素標(biāo)記G2期、S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VCAM-1/CD106 ELISA kit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標(biāo)記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM134C FAM134C蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞趨化因子 96T
MrpL28 英文名稱: 線粒體核糖體蛋白L28抗體 0.1ml
phospho-AMPK alpha 2 (Ser491) 英文名稱: 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 0.1ml
Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標(biāo)記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF-1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)ELISA試劑盒,英文名:3-OMD ELISA KiISA Kit for Human Mitogen-activated protein kinase 14大鼠微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒,英文名:MAP-2 ELISA KiISA Kit for Human Microphthalmia-associated transcription factor大鼠皮質(zhì)酮(CORT)ELISA試劑盒,英文名:CORT ELISA KiISA Kit for Human Neogenin大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒,英文名:MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA KiISA Kit for Human Pleckstrin homology domain-containing family O member 1大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒,英文名:T ELISA KiISA Kit for Human cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit alpha大鼠別孕烯醇酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA試劑盒,英文名:AP/3α,5α-THP ELISA KiISA Kit for Human Peroxiredoxin-4大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒,英文名:CRP ELISA Kit
ELISA Kit for Dihydrotestosterone小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA試劑盒,英文名:TIMP4 ELISA KiISA Kit for Human Lithostathine-1-beta大鼠脂肪酸合酶(FASN)ELISA試劑盒,英文名:FASN ELISA KiISA Kit for Human Spermine oxidase大鼠微纖絲關(guān)聯(lián)蛋白4(MFAP4)ELISA試劑盒,英文名:MFAP4 ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4大鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA試劑盒,英文名:uPAR ELISA KiISA Kit for Human RISC-loading complex subunit TARBP2大鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)ELISA試劑盒,英文名:IκBα ELISA KiISA Kit for Human Ceramide glucosyltransferase大鼠簇集蛋白(CLU)ELISA試劑盒,英文名:CLU ELISA Kit大鼠Slit同源物1(Slit1)ELISA試劑盒,英文名:Slit1 ELISA Kit
胎血清(特優(yōu)級(jí)) 500ml Hyclone
ZNF263 英文名稱: 鋅指蛋白263抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DYRK2 英文名稱: 雙特異性酪酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶DYRK2抗體 0.2ml
β-酪蛋白(抗體)兔抗山羊、綿羊 Anti-Beta-casein 0.1ml
Anti-SLC4A4/FITC 熒光素標(biāo)記碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
一氧化氮合成酶-3抗體 Anti-NOS-3/eNOS 0.1ml
5-HTR1A 英文名稱: 5-羥色胺受體1A抗體 0.1ml
EB2 英文名稱: 微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser46) 磷酸化抑制基因P53抗體 規(guī)格 0.1ml
ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg