詳細介紹
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293001B價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293001B價格
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 表達Sars結(jié)構(gòu)蛋白
培養(yǎng)條件 IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;500ug/ml IL-2
傳代方法 1:
6傳代;2~3天1次
傳代情況 P10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9;D18S51:18,22;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23,24;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
OTF2B(Human octamer transcription factor 2B) ELISA Kit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PD-1/CD279 程序性死亡1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HMGCR 三羥基*基輔酶A還原酶抗體 規(guī)格 0.2ml
eNOS-3(Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3)ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 96T
CD162 英文名稱: P選擇素糖蛋白配體1抗體 0.2ml
C1orf52 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml
Anti-PD-1/CD279 程序性死亡1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人紐蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HPR 結(jié)合珠蛋白相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿 96T
Phospho-PKR (Thr446 + Thr451) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶R抗體 0.1ml
Cryptochrome 1 英文名稱: 隱花色素蛋白1抗體 0.2ml
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人金屬調(diào)整轉(zhuǎn)錄因子1(MTF1)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠細胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA試劑盒,英文名:CK 18-M65 ELISA KiISA Kit for Human Multidrug resistance protein 1小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒,英文名:PDGF-AB ELISA KiISA Kit for Human Adenosine deaminase domain-containing protein 1小鼠腎素前體(renin precursor)ELISA試劑盒,英文名:renin precursor ELISA KiISA Kit for Human Beta-amyloid protein 42小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)ELISA試劑盒,英文名:sTLR4 ELISA KiISA Kit for Human Acidic mammalian chitinase小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒,英文名:BMP-7 ELISA KiISA Kit for Human CX3C chemokine receptor 1小鼠白介素2受體β(IL2rb/CD122)ELISA試劑盒,英文名:IL2rb/CD122 ELISA KiISA Kit for Human Plaet glycoprotein 4小鼠Apelin 13(AP13)ELISA試劑盒,英文名:AP13 ELISA Kit
人轉(zhuǎn)錄激活因子MybELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒,英文名:FK ELISA KiISA Kit for Human Disabled homolog 1小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)ELISA試劑盒,英文名:TRF ELISA KiISA Kit for Human Pikachurin小鼠線粒體乙醛脫氫酶(ALDM)ELISA試劑盒,英文名:ALDM ELISA KiISA Kit for Human Fibromodulin小鼠色胺酸羥化酶1(TPH1)ELISA試劑盒,英文名:TPH1 ELISA KiISA Kit for Human Gamma-secretase-activating protein小鼠可溶性半乳糖凝集素3結(jié)合蛋白(LGALS3BP)ELISA試劑盒,英文名:LGALS3BP ELISA KiISA Kit for Human Hyaluronan synthase 1小鼠谷氨酸半胱氨酸連接酶(GCLM)ELISA試劑盒,英文名:GCLM ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-17D小鼠補體3a(C3a)ELISA試劑盒,英文名:C3a ELISA Kit
兔抗BSA 0.5ml 國產(chǎn)
WDR26 英文名稱: 心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr249) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 規(guī)格 0.1ml
HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DP-II 英文名稱: 橋粒斑蛋白2抗體 0.2ml
Anti-AATK AATK細胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-WWOX /FITC 熒光素標(biāo)記包含氧化還原酶的WW域抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Collagen IV (Anti-Collagen Type IV ) IV型膠原抗體(Collagen Ⅳ Ⅳ 型膠原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 Anti-ABCG1 0.1ml
5HT5B Receptor 英文名稱: 5-羥色胺受體5B抗體 0.1ml
ENPP6 英文名稱: 磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FLT3 (Tyr969) 磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3 規(guī)格 0.1ml
Collagen IV (Anti-Collagen Type IV ) IV型膠原抗體(Collagen Ⅳ Ⅳ 型膠原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg