詳細介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:17-酮皮質(zhì)類固醇ELISA檢測試劑盒
英文名稱:l7-ketosteroid
檢測范圍:2.5μmol/L~80μmol/L
貨號:YS-E96330
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
硫酸粘桿菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Colistin Sulphate 1264-72-8 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
鹽酸依氟鳥氨酸 Eflornithine HCl 96020-91-6 質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物
色甘酸鈉 Cromolyn sodium 15826-37-6 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養(yǎng)
色甘酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Cromolyn sodium 15826-37-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A Cyclosporine A 59865-13-3 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclosporine A 59865-13-3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
鹽酸噻氯匹定 Ticlopidine HCl 53885-35-1 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
鹽酸噻氯匹定(標(biāo)準(zhǔn)品) Ticlopidine HCl 53885-35-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
阿糖胞苷(進分) Cytarabine 147-94-4 質(zhì)量規(guī)格:進分,Sigma C1768
阿糖胞苷 Cytarabine 147-94-4 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,細胞培養(yǎng)級
阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Cytarabine 147-94-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
達卡巴嗪 Dacarbazine 891986 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于細胞培養(yǎng)
達卡巴嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Dacarbazine 891986 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
達沙替尼(無水) Dasatinib 302962-49-8 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%,無水
達沙替尼(無水)(標(biāo)準(zhǔn)品) Dasatinib 302962-49-8 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
17-酮皮質(zhì)類固醇ELISA檢測試劑盒Palatinose Hydrate 異麥芽酮糖-帕拉金糖 100g 瓶
抗酸染色液(試劑盒) 3×250ml 瓶
Menadione 維生素K3 10g 瓶
D-Glutamic acid D-谷氨酸 10g 瓶
*0感受態(tài)細胞 10×100ul 袋
酵母基因組DNA提取試劑盒 100T 盒
兔抗馬IgG-HRP 0.1ml 支
彩虹245plus廣譜蛋白Marker(5-245KD) 250ul 支
新生牛血清 200ml 瓶
Scopolamine hydrobromide-Hyoscine hydrobromide 東莨菪堿 114-49-8 20mg