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          人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1培養(yǎng)

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2018-04-18 11:44:02瀏覽次數(shù):1494

          聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

          詳細(xì)介紹

          細(xì)胞名稱  人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1培養(yǎng)
          形態(tài)特性 上皮細(xì)胞

          品牌 貼壁生長(zhǎng)

          特征特性 腫瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳瘤病毒的18(HPV-18)進(jìn)行轉(zhuǎn)化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細(xì)胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時(shí),在雄激素作用下,RWPE-1細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時(shí),RWPE

          培養(yǎng)條件 這株細(xì)胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基K-SFM,kit目錄號(hào)17005-042。隨kit提供這株細(xì)胞生長(zhǎng)所需的兩種添加劑(牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長(zhǎng)因子EGF)。 配制*生長(zhǎng)培養(yǎng)基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。

          傳代方法 消化3-5分鐘。1:

          2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。  

          傳代情況 P(52+5)

          凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

          支原體檢測(cè) 陰性 

          STR

          同工酶

          染色體

          使用權(quán)限 A類

          人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
          操作流程:
          1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
          1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
          1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
          1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
          1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
          1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
          1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
          1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
          Beta-CG ELISA Kit 大鼠絨毛膜促性腺激素βMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC 熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽 1-40 C端抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 叉頭蛋白O1/O3/O4抗體 規(guī)格 0.2ml

          cath-K ELISA Kit 大鼠組織蛋白酶K 96T

          alpha Internexin 英文名稱: α-中連蛋白抗體 0.1ml

          ADAMTS8 英文名稱: 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體 0.2ml

          Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC 熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽 1-40 C端抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti-Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh HP1 gamma 異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體 規(guī)格 0.2ml

          TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2 96T

          PKC alpha 英文名稱: 蛋白激酶C α抗體 0.2ml

          COUP-TF1 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體 0.2ml

          Anti-Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
          人細(xì)胞質(zhì)組氨酰(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒,英文名:TNNI2 ELISA KiISA Kit for Human UDP-glucuronosyltransferase 1-1大鼠蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)因子6(RGS6)ELISA試劑盒,英文名:RGS6 ELISA Kit人Wnt-10a蛋白(WNT10A)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素34(IL34)ELISA試劑盒,英文名:IL34 ELISA Kit大鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒,英文名:SELE ELISA Kit豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒,英文名:SCF/MGF ELISA Kit血管緊張素(1-7)(Angiotensin (1-7))ELISA試劑盒通用96T0.156-10 ng/mL小鼠組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)ELISA試劑盒,英文名:HDAC1 ELISA KiISA Kit for Human Vasopressin V1b receptor小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒,英文名:KLH ELISA Kit

          ELISA Kit for Human Glycosylated hemoglobin A1c小鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒,英文名:DIO3 ELISA Kit人骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1(ACTα1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 umol/mL小鼠脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒,英文名:DPD ELISA KiISA Kit for Human Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]小鼠去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒,英文名:NE ELISA Kit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒,英文名:CC16 ELISA KiISA Kit for Human Calponin-2小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒,英文名:MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit人鈣蛋白酶6(Calpain-6)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒,英文名:SP-B ELISA KiISA Kit for Human C-C motif chemokine 17小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒,英文名:IL-9 ELISA Kit
          小鼠血清封閉液 10ml Gibco原料,2%血清

          VEGF-D 英文名稱: 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D型抗體 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗體 規(guī)格 0.1ml

          Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67) Ki-67 AntigenMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          DNA polymerase eta 英文名稱: DNA聚合酶η抗體 0.2ml

          Anti-phospho-Afadin(Ser1718) 磷酸化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
          MN(Human Mannose) ELISA Kit 人甘露糖Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr1018) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh HMG14/HMGN1 高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 規(guī)格 0.1ml

          16- Alpha OHE-1(Mouse 16- AlphaHydroxyestrogen 1)ELISA Kit Hpt/HP小鼠16α羥基雌酮1 96T

          PCB 英文名稱: 酸羧化酶抗體 0.2ml

          C1orf172 英文名稱: 1號(hào)染色體開放閱讀框172抗體 0.2ml

          Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr1018) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
          懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。

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