詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:人線粒體DNA PCR檢測試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
遲鈍愛德華菌PCR檢測試劑盒 Edwardsiella tardaPCR.南非諾卡菌PCR檢測試劑盒 Nocardia transvalensisPCR.沃爾巴克氏菌通用PCR檢測試劑盒 Wolbachia spp.PCR
實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 ,英文名: NGF ELISA Kit
小鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA檢測試劑盒MouseStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 96T/48T
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)免疫試劑盒 Human MBP/MBL ELISA Kit
RatinhibinB,INH-BELISAKit大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BrdU標記法細胞繁殖熒光定量檢測試劑盒10/50次
Mouseisletcellaibody,ICAELISA試劑盒小鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
glypican 1 0脂?;嫉鞍拙厶?span>-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
MMP1 MMP-1 鼠單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CTNNBIP1 (Ser36) 0酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Western二抗稀釋液 250ml 自產(chǎn)
ZNF300 英文名稱: 鋅指蛋白300抗體 0.2ml
DGKE 英文名稱: 二?;视?span>5抗體 0.2ml
MMP1 MMP-1 鼠單抗 (FITC) Human
人線粒體DNA PCR檢測試劑盒大鼠toll樣受體1(TLR1)ELISA試劑盒 ,英文名: TLR1 ELISA Kit
Mouse factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠可溶性E-選擇素(mouse sE-Selectin/sCD62E) 48T/96T 進口分裝
CLIAKitforIgAELISAKit大鼠免疫球蛋白A規(guī)格:48T/96T
通用型禽白血病A/B/C亞型(ALV-A/B/C)試劑盒20次
ELISAKitPepsin大鼠胃規(guī)格:48T/96T
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍