詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:人腫瘤多藥耐藥基因PCR檢測試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關產(chǎn)品:
里氏埃里希氏體PCR檢測試劑盒 Ehrlichia risticiiPCR.蜜蜂微孢子蟲通用PCR檢測試劑盒 Nosema spp.PCR.亞巴猴腫瘤病毒病毒PCR檢測試劑盒 Yaba Monkey Tumor Virus(YMTV)PCR
實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 ,英文名: NP-Y ELISA Kit
小鼠基質(zhì)金屬抑制因子4(TIMP-4)ELISA檢測試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAkit 96T/48T
人甘油三酯(TG)免疫試劑盒 Human iglyceride,TG ELISA Kit
RatImmunoglobulinA,IgAELISAKit大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒200次
Mouseierleukin8,IL-8ELISA試劑盒小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-CD4/HRP 辣根過氧化物酶標記CD4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mink IgG 水貂IgG (親和化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
人類白細胞抗原E Anti-HLA-E 0.1ml
Rabbit Anti-Avidin 兔抗親和素 1mg
FoxP1 英文名稱: 叉頭蛋白P1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Ret/HSCR1(Tyr1062) 0酸化原癌基因酪蛋白受體RET抗體 規(guī)格 0.1ml
Mink IgG 水貂IgG (親和化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
人腫瘤多藥耐藥基因PCR檢測試劑盒大鼠β-轉導重復相容蛋白(β-CP)ELISA試劑盒 ,英文名: β-CP ELISA Kit
Mouse esadiol (E2) ELISA Kit 小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠基質(zhì)金屬-9(mouse MMP-9) 48T/96T 進口分裝
CLIAKitforIL-16(HumanIerleukin16)ELISAKIT人白介素16規(guī)格:48T/96T
通用型硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitBK大鼠血管舒緩激肽規(guī)格:48T/96T
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍