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γ－ CA

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

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產(chǎn)品名稱：RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞)

規(guī)格：5×106cells

貨號：YS-02X9936

產(chǎn)品分類:細胞系

儲存條件2℃-8℃，避光儲存

運輸條件冰袋冷藏運輸

注意事項

1、使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。

2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。

4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。

5、本產(chǎn)品只供進一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。

 

實驗材料：

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶

2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞

3、50ml離心筒2個

4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個

6、細胞計數(shù)板1塊；

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；

8、酒精燈1臺；

細胞復蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>

2：準備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中

生化管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支/盒

42℃生長試驗生化管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支/盒

酸肉湯 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

乳糖發(fā)酵管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

Korser氏肉湯 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

蛋白胨（酸肉湯） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

衛(wèi)矛半固體 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

山梨發(fā)酵管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

丙二酸鹽 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

楊苷發(fā)酵管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞)67920-52-9丹參鈉;Sodium danshens 規(guī)格： 20mg

2468-21-5長春質(zhì) 規(guī)格： 20mg

龍血竭 規(guī)格： 0.5g

86479-06-3鈴脲;純品型;標準品;;有證書 規(guī)格： 0.1g

遼東楤木皂Ⅹ 規(guī)格： 20mg

長春 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/支

2469-34-3遠志皂元 規(guī)格： 20mg

明黨參 規(guī)格： 1g

（）新 規(guī)格： 200mg

紅曲（特殊發(fā)酵） 規(guī)格： 1g