相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅱ(TGFβR2)PCR檢測(cè)試劑盒 ,英文名: TGFβR2
犬胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 50T
犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒 Dog iercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54
英文名稱HumanansferrieceptorELISAKit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)PCR檢測(cè)試劑盒
超氧化物歧化酶(SOD)紅細(xì)胞裂解樣品
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:中華鱘特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允?span>DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl)???1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠鎖鏈素(Desmosine)ELISA試劑盒 ,英文名: Desmosine ELISA Kit
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAkit 96T/48T
人(GSH)免疫試劑盒 Human glathione,GSH ELISA Kit
RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
APC蛋白標(biāo)記試劑盒1次(1毫克/次)
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒小鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-PAX3/FITC 熒光素標(biāo)記配對(duì)盒基因3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Rabbit IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗兔IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
結(jié)直腸癌缺失基因抗體 Anti-DCC 1ml
Mouse Anti-human IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
FADS2 英文名稱: 脂肪酸脫氫酶2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) 0酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-Rabbit IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗兔IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
中華鱘特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)ELISA試劑盒 ,英文名: Col Ⅵ ELISA Kit
Mouse bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒
MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumahrombomodulin,TMELISAKit人血栓調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格:48T/96T
通用型羊進(jìn)行性肺炎(Ovineprogressivepneumonia)試劑盒20次
ELISAKitHSP-27大鼠熱休克蛋白27規(guī)格:48T/96T