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詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品名稱：R 1610(倉鼠肺細(xì)胞)
規(guī)格：5×106cells
貨號：YS-02X9926
產(chǎn)品分類:細(xì)胞系
儲存條件2℃-8℃，避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
細(xì)胞復(fù)蘇步驟：
1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋
4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化
5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6：1200rpm離心3分鐘
7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
MARCH7/Axotrophin 膜相關(guān)環(huán)指7抗體 規(guī)格: 0.2ml
Glycogen synthase 2 合成2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Gab1 (Tyr627) 磷化接Gab 1抗體 規(guī)格: 0.1ml
VAMP-3 囊泡相關(guān)膜3抗體 規(guī)格: 0.2mlC9orf174 9號染色體開放閱讀框174抗體 規(guī)格: 0.2ml
Histone H1 組H1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml
ECRG4/C2orf40 食道相關(guān)基因4抗體 規(guī)格: 0.2mlSPRR1a/Cornifin A 角質(zhì)α抗體 規(guī)格: 0.2ml
Lxn/Latexin 羧肽抑制劑抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-STAT3 (Ser727) 磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 規(guī)格: 0.1ml
G protein beta 3/GNB3 Gβ3抗體/鳥核結(jié)合β亞基3 規(guī)格: 0.2mlLOXL4 賴氨酰氧化樣4抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-LCK(Tyr394) 磷化淋細(xì)胞特異性激抗體 規(guī)格: 0.1ml
R 1610(倉鼠肺細(xì)胞)商陸皂甲 規(guī)格： 20mg
327-97-93-O-啡酰奎寧;3-O-caffe 規(guī)格： 20mg
13395-02-3馬兜鈴內(nèi)酰胺 規(guī)格： 20mg
桂枝 規(guī)格： 0.5g
50816-24-55-羥基馬鞭草 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
970-74-1表沒食子兒茶 規(guī)格： 20mg
483-15-8二氫小檗 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg/支
50-78-2乙酰楊 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
胡黃蓮-I 規(guī)格： 20mg
520-18-3（莰菲) 規(guī)格： 20mg
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
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